生防假单胞杆菌2P24群体感应系统上游调控因子的克隆和功能分析

本研究室前期工作克隆了荧光假单胞生防菌2P24的群体感应(Quorum sensing，QS)系统的组成基因pcoI/pcoR，并通过分子遗传学手段证明该调控系统与常见的生防菌生防因子，如抗生素、嗜铁素、蛋白酶的产生无关；但是控制生防菌2P24在植物根围的定殖能力，并影响该菌对土传植物病害的生物防治效果。本项目通过转座子Tn5介导的随机突变方法，以含有pcoI::lacZ报告结构的菌株为受体，构建突变体文库，通过报告基因lacZ表达活性的变化，筛选转录水平上调控QS系统的上游因子。通过克隆，定位突变和互补试验证明这些上游因子对QS系统的调控功能，通过DNA凝胶迁移试验、Northern杂交等手段分析这些调控因子对QS系统的作用模式，并通过生物测定说明调控因子与生防菌株防病效果之间的关系。该研究不仅可进一步解析植物病害生防细菌的防病机制，对细菌胞内信号传导网络的阐明也有一定贡献。