辛温通阳药治疗慢性心力衰竭作用机制及对其介导因子CTGF的干预研究

CTGF is an important factor mediated myocardial fibrosis and heart failure in the process of prophase research, we found that Xin Wen Tongyang medicine: onion extract can affact the regulation of CTGF expression and function of a variety of upstream factor(TNF, NOS, Ang II),promote onion extract may be mediated through multiple upstream factor role in regulation of CTGF expression and function, which may be the biological basis in the treatment of CHF of the “Micheharu phleqm”.The TNF rat myocardial tissue changes after this study intends to establish a rat model of CHF,RAS activation-induced myocardial cells in vitro fibrosis,observe the Conbai extraxt intervention,simultaneous detection of inducedn of Ang II the myocardial fibrosis important factor,TGF-β1，CTGF，typeⅠcollagen, type Ⅲ collagen,FN gene expression levels.Ang II induction and the establishment of cardiac fibroblasts fibrosis model druga in state intervention in the of CTGF high expression was observed ,the expression of other fibrosing factor.. Onion extract treatment of chronic heart failure in order to clarify the mechanism This study also reveal "Yang barrier" role of theory in the CHF and found that CHF theoretic targets and drug provides a theoretical basis.

CTGF是介导心肌纤维化及心力衰竭过程中的重要因素，前期研究中我们发现辛温通阳药：葱白提取物可影响调控CTGF表达和功能的多钟上有因子（TNF、NOS、AngⅡ等），提示葱白提取物可能通过介导多种上游因子作用，，调控CTGF表达和功能，这也可能是葱白提取物发挥“通阳化痰”治疗CHF可能的生物学基础。本研究拟采取体内和体外实验的方法，以结扎腹主动脉法建立CHF大鼠模型，用RAS激活诱导体外心肌细胞纤维化，观察葱白提取物干预后CHF大鼠心肌组织的变化，同时检测致心肌纤维化重要因子AngⅡ、TGF-β1、CTGF、Ⅰ型胶原蛋白、Ⅲ型胶原蛋白、FN的基因表达水平。采用AngⅡ诱导和建立心肌成纤维细胞纤维化模型，观察药物在干预CTGF高表达的状态下，对其他致纤维化因子表达的影响。以期阐明葱白提取物治疗慢性心力衰竭的机制，本研究也对于揭示"阳气不通"理论在CHF中的作用，及发现治疗CHF靶点和理论基础。

CTGF是介导心肌纤维化及心力衰竭过程中的重要因素，前期研究中，我们发现辛温通阳药：葱白提取物可影响调控CTGF表达和功能的多种上游因子（TNF、NOS、AngII等），提示葱白提取物可能通过介导多种上游因子作用，调控CTGF表达和功能，这也可能是葱白提取物发挥“通阳化痰”作用治疗CHF可能的生物学基础。本研究拟采取体内和体外实验的方法，以结扎腹主动脉法建立CHF大鼠模型，用RAS激活诱导体外心肌细胞纤维化，观察葱白提取物干预后CHF大鼠心肌组织的变化，同时检测致心肌纤维化重要因子AngⅡ、TGF-β1、CTGF、Ⅰ型胶原蛋白、Ⅲ型胶原蛋白、FN的基因表达水平。采用AngⅡ诱导和建立心肌成纤维细胞纤维化模型，观察药物在干预CTGF高表达的状态下，对其他致纤维化因子表达的影响。.体内研究结果：1、CHF模型组与正常组相比，血浆及心肌组织AngⅡ、AT1R、TGF-β1以及心肌AngⅡ、AT1R、TGF-β1、CTGF mRNA等表达明显增加（P<0.05）；2、葱白组CTGF、Ⅲ型胶原、ANG2 mRNA表达水平显著低于CHF模型组(P<0.05)；3、葱白组的各项指标均低于同组的芪苈胶囊组与依拉普利组（P<0.01）。结论：CTGF可能是心脏纤维化发生发展的中心环节， AngII 可诱导心房成纤维细胞中的 TGF-β1/Smad 信号通路使 CTGF 表达上调，而葱白提取物可通过介导多种上游因子的作用，调控CTGF的表达，从而改善心力衰竭和心肌重构。.体外细胞研究结果：我们采用腺病毒将心肌细胞中CTGF沉默，筛选稳转的CTGF干扰心肌细胞。随后，我们将葱白提取物加入到心肌细胞中。我们发现，加入葱白提取物的心肌细胞中，CTGF mRNA表达量明显上调，FN mRNA表达量也明显下调。同时，我们在蛋白中验证，发现CTGF和FN的蛋白表达量，在加入葱白提取物之后，也明显下调。与此同时，我们加入CTGF-shRNA，该下调作用更加明显。综上所述，葱白提取物对心肌细胞中CTGF具有明显的下调作用，同时也明显下调FN的表达。由此说明，葱白提取物具有明显的抑制心肌细胞纤维化的作用，而该作用是通过下调CTGF和FN的表达来实现的。这为后期葱白提取物在心衰临床治疗中的应用提供了实验依据。