S1PR1表达上调持续激活STAT3在急性髓系白血病发病机制中的作用研究

近年来发现S1P/S1PR1与实体肿瘤新生血管形成及转移密切相关。我们的初步研究结果显示，初发及复发急性髓系白血病（AML）患者S1PR1 mRNA及蛋白表达均显著升高，但其在AML中的意义及机制尚不明确。最新研究显示部分实体肿瘤中S1PR1与STAT3活化呈正反馈调节从而导致STAT3持续激活。目前，STAT3持续激活在肿瘤发生发展中起到关键作用已得到公认。但经典的STAT3信号激活因子如IL-6受负反馈机制严格调控，其对STAT3的激活作用只是暂时性的。我们的研究也显示，除S1PR1 表达升高外，初发及复发AML患者STAT3活化水平高于正常对照。故推测S1PR1在AML中的升高与STAT3持续激活相关。本课题拟通过研究AML细胞系及相应动物模型中STAT3、S1PR1和IL-6间相互调节，深入研究S1PR1与STAT3的反馈调节在AML发病中作用，为探索AML治疗新靶点提供实验室依据

摘要：.近年来发现S1P/S1PR1与实体肿瘤新生血管形成及转移密切相关。我们的初步研究结果显示，初发及复发急性髓系白血病（AML）患者S1PR1 mRNA及蛋白表达均显著升高，但其在AML中的意义及机制尚不明确。.研究分为四个部分：1、收集16例正常人骨髓标本，培养K¬¬562、HL60人髓系白血病细胞，并检测发现K562、HL60细胞系的S1PR1、STAT3 mRNA表达均低于正常骨髓均值，但IL-6mRNA表达与正常对照差异无统计学意义。2、收集了99例各阶段的AML患者骨髓标本，发现初发AML与复发难治AML患者S1PR1mRNA明显高于正常骨髓，而治疗后CR患者的S1PR1与正常骨髓相似，各组患者STAT3、IL-6 mRNA表达差异无统计学意义。3、在K562和U937细胞系中过表达或干扰S1PR1,发现过表达S1PR1组细胞较空白对照组增殖明显活跃，凋亡明显减少，而干扰S1PR1组细胞较空白组增殖明显低下，凋亡明显增多。Western blot检测显示干扰S1PR1组中P-STAT3表达低于空白组，凋亡蛋白caspase3表达高于空白对照。而过表达S1PR1组中P-STAT3表达高于空白组，凋亡蛋白caspase3表达低于空白对照。4、构建S1PR1干扰或过表达的U937细胞系，Western blot检测显示S1PR1干扰组中p-JNK、p-C-Jun明显高于过表达S1PR1组，而p-ERK1/2、p-MKK1表达明显低于过表达S1PR1组，提示S1PR1通过抑制JNK信号通路减少细胞凋亡，并通过激活MKK1-ERK信号通路促进细胞增殖。.研究结果显示S1PR1上调引起AML细胞增殖，抑制凋亡，并与STAT3存在正反馈，进一步导致AML细胞增殖，为AML治疗提供了新的治疗靶点。