新的缺血预适应相关基因WDR26对脑缺血-再灌注损伤的保护作用及其机制研究

WDR26是项目组成员所在实验室首次克隆的一个新的缺血预适应相关基因，在脑组织中表达丰富，但其在脑缺血-再灌注损伤过程中是否具有及具有何种生物学意义，目前尚不清楚。本项目在首次发现WDR26具有脑细胞保护功能的基础上，分别从mRNA和蛋白质水平全面检测新基因WDR26在大鼠脑缺血-再灌注时的时空表达模式；以绿色荧光蛋白（GFP）为示踪蛋白确定正常和氧化应激状态下WDR26在神经细胞中的亚细胞定位；采用基因转染和RNA干扰探讨WDR26的脑细胞保护功能；并根据WDR26是一个WD-重复蛋白的特性，采用免疫共沉淀、免疫荧光等技术筛选及确定正常和氧化应激状态下WDR26在脑细胞中的相互作用蛋白；从而进一步阐明WDR26的脑保护功能及其作用机制，为临床上寻找防治脑缺血-再灌注损伤的新的干预措施提供实验依据。

本项目对新的缺血预适应相关基因WDR26对脑缺血-再灌注损伤的保护作用及其机制进行了深入探讨，主要发现如下：1. 首次发现WDR26在大鼠脑缺血预处理时表达上调；2. 首次发现WDR26在H2O2所致神经细胞及神经胶质细胞损伤过程中表达上调；3. 首次发现WDR26与线粒体共定位；4. 首次探讨了WDR26过表达对H2O2所致SH-SY5Y细胞及U251-MG细胞损伤的影响，发现WDR26过表达能够提高H2O2处理后的细胞存活率，抑制H2O2处理后的细胞凋亡，抑制H2O2处理后的caspase-3活性；5. 首次探讨了WDR26表达抑制对H2O2所致SH-SY5Y细胞及U251-MG细胞损伤的影响，发现WDR26表达抑制能够抑制H2O2处理后的细胞存活，促进H2O2处理后的细胞凋亡，提高H2O2处理后的caspase-3活性；6. 探讨了WDR26过表达对H2O2所致SH-SY5Y细胞中AP-1活化的影响，发现WDR26过表达能够抑制H2O2处理后AP-1 DNA结合能力，并抑制AP-1的转录活性。