乳腺癌他莫昔芬治疗耐药的新机理

Tamoxifen (TAM) resistance is a major clinical problem for treating ER positive breast cancer (BC). Exploring novel molecules and mechanisms in the process of modulating TAM resistance is of great significance to overcome drug resistance and improve clinical outcomes. In the present study, we found a novel TAM resistance promoter, HPIP, which could oppositely regulate ERα and HER2 expression, and activate PI3K/AKT pathway. Therefore, qPCR, promoter activity luciferase assay, IP-mass, ChIP, Western blot analysis are to be performed to study the regulatory mechanisms of ERα and HER2 by HPIP in-depth. Experiments such as drug resistance curve analysis, soft agar, and animal experiment are to be performed to test the effect of HPIP on TAM resistance and the relationship with its regulation of ERα, HER2, and PI3K/AKT. The clinical significance of HPIP and its correlation with ERα and HER2 expression are to be determined in TAM therapy using clinical samples of BC patients. This study will lay a solid foundation for elucidation of molecular mechanisms of TAM resistance and identification of novel targets of TAM resistance diagnosis and therapy in BC patients.

他莫昔芬（TAM）耐药是ER阳性乳腺癌治疗面临的一大难题。发现调控TAM耐药过程中的新分子、新机制对克服耐药，改善预后至关重要。我们的前期工作发现了一个能反向调控ERα、HER2表达，并能激活PI3K/AKT通路的新型耐药因子HPIP。我们拟利用实时定量PCR、启动子活性分析、免疫共沉淀结合质谱法、染色质免疫共沉淀、Western-blot等技术深入研究HPIP对ERα、HER2表达调控的分子机制；利用耐药曲线分析、软琼脂克隆形成、动物实验等检测HPIP对乳腺癌细胞TAM治疗敏感性的影响及与调控ERα、HER2、PI3K/AKT的关系；利用临床标本检测HPIP表达在TAM治疗中的意义及与ERα、HER2表达的相关性。本研究将为阐明TAM耐药分子机制及发现新的TAM耐药诊疗靶标打下坚实基础。

他莫昔芬（TAM）耐药是ER阳性乳腺癌治疗面临的一大难题。发现调控TAM耐药过程中的新分子、新机制对克服耐药，改善预后至关重要。我们的工作发现了一个能反向调控ERa、HER2表达，并能激活PI3K/AKT通路的新型耐药因子HPIP。利用实时定量PCR、启动子活性分析、免疫共沉淀结合质谱法、染色质免疫共沉淀、Western-blot等技术深入研究HPIP对ERa、HER2表达调控的分子机制，结果显示，HPIP募集组蛋白乙酰化酶PCAF与转录因子STAT3，形成复合体，募集于HER2启动子，从而激活HER2基因的转录；而HPIP募集组蛋白去乙酰化酶HDAC1与转录因子STAT3形成复合体，募集于ERa启动子，抑制ERa基因的转录。利用耐药曲线分析、软琼脂克隆形成、动物实验等检测HPIP对乳腺癌细胞TAM治疗敏感性的影响及与调控ERa、HER2、PI3K/AKT的关系，结果发现，HPIP介导了乳腺癌细胞对TAM治疗耐受，且该耐受表型与HPIP调节ERa、HER2、PI3K/AKT通路相关。利用临床标本检测HPIP表达在TAM治疗中的意义及与ERa、HER2表达的相关性，结果显示，HPIP在TAM治疗耐受患者中高表达，因此，HPIP高表达预示着乳腺癌患者对TAM治疗耐受。本研究将为阐明TAM耐药分子机制及发现新的TAM耐药诊疗靶标打下坚实基础。