麻疹病毒准种变异对麻疹疫苗保护力的影响及机制研究

Measles is viral respiratory infection disease caused by the measles virus.Measles virus was previously thought to be a highly conserved virus, and measles morbidity and mortality had been well controlled since the first measles vaccine was produced in 1963. However, studies in the early 1980 of the 20th century have found that the wild-type measles virus strains have a mutation in the gene and themutation can be accumulated over time, which would compromise protective effects of current measles vaccine. But the mechanisms behind the mutations as well as reduced effectiveness of measles vaccine are not fully understood, including the variation trend of the measles virus, the relationship between the mutation of the virus and the reduced capacity of the measles virus, as well as the phenomenon of natural selection. This research intends to proved measles associate species phenomenon of exists through on the mutation and the virological characteristics of wild-type measles virus strain, then stated measles associate species variation on measles vaccine protection force effect of mechanism, eventually for explained measles continues to outbreak with high vaccine vaccination rate, and for measles virus of research and the vaccine improved provides based data.

麻疹是由麻疹病毒引起的一种呼吸道传染病。麻疹病毒一直被认为是一种高度保守的病毒，自从1963年第一支麻疹减毒活疫苗问世以来，麻疹的发病率与死亡率都得到了有效的控制。但是从20世纪80年代初对麻疹野毒株研究发现，麻疹野毒株基因发生了变异，并且可以随时间而累积。已经有研究表明，现行的麻疹减毒活疫苗的保护力有所下降，但是对于麻疹病毒的变异趋势、病毒变异与麻疹疫苗保护能力下降的关系、麻疹病毒的自然选择现象对于我们控制和消除麻疹提供了什么启示等基础科学问题尚未有深入研究。本研究拟通过对现行麻疹野毒株的基因变异情况、病毒学特点、以及交叉中和实验等研究，证明麻疹准种现象的存在，进而阐明麻疹准种变异对麻疹疫苗保护力影响的机制，最终为解释目前高疫苗接种率下麻疹继续暴发流行这一既存事实找到可供参考的科学依据，并且为我国麻疹病毒的研究及疫苗改进、研发新一代麻疹疫苗提供基础性数据。

麻疹是由麻疹病毒引起的一种呼吸道传染病。虽然麻疹疫苗的使用使麻疹的发病率和死亡率大幅度降低，但是至今，麻疹仍是严重威胁儿童健康和生命安全的全球（特别是发展中国家）公共卫生问题。本研究收集了2016年-2017年吉林省疑似麻疹病例标本18份，经Vero/SLAM细胞接种培养后，成功分离得到麻疹病毒7株。经M基因扩增产物，1%琼脂糖凝胶电泳鉴定，均为麻疹病毒。对7株麻疹野病毒及我实验室之前保存的5株麻疹野毒株N基因羧基末端450个核苷酸序列进行分析，并与WHO基因库中其它22个基因型的Edm标准株、疫苗株的对应序列做基因亲缘性关系做比对，结果提示：12株分离的麻疹野病毒基因型为H1基因型，同时证明麻疹野毒株在氨基酸水平与核苷酸水平上已经发生变异，进而阐明了2016-2017年吉林省爆发流行的麻疹野毒株的病毒学特点。通过病毒蚀斑实验结果显示，来自同一野毒株产生的蚀斑在出斑时间、蚀斑大小、形态上都存在差异，提示野毒株可能为不同克隆株的混合物，并通过基因扩增测序加以证实。随后，我们选取3株野毒株和3株克隆株分别接种于原代人羊膜细胞(HAM)、原代鸡胚细胞(CEC)进行减毒培养，实验结果提示2株病毒在CEC上连续传代后，毒力已经有所减弱，3株克隆株病毒经减毒实验后，毒力无明显变化。该结果提示，现今流行的麻疹野毒株是一个麻疹病毒的“混合体”。本研究成果查明抗原变异对我国现行使用疫苗保护效果的影响，评价我国疫苗的保护效果，丰富了我国和全球麻疹病毒核苷酸、氨基酸数据库，为我国是否需要研制新型麻疹疫苗提供科学的依据。