IL-27对银屑病iNKT细胞和Th17细胞免疫调节和效应应答的研究

Interleukin-27 (IL-27) belongs to the IL-12 family which plays a wide range of immune regulation effect on various immune cells in innate and adaptive immunity. Our previous studies found that the levels of IL-27P28 and IL-27EBI3 mRNA were significantly decreased in PBMC and skin lesion from patients with psoriasis compared to healthy controls. The levels of IL-17A, IL-21, IL-22mRNA in PBMC and skin lesions from patients with psoriasis were higher than those in healthy controls. Th17 cells in PBMC were significantly increased in patients with psoriasis. In the present study, we will investigate immune regulation of IL-27 on iNKT cells and Th17 cells. We firstly isolate Naive CD4+ T cells from PBMC in patients with psoriasis and co-culture with IL-27 in vitro, then evaluate the impact of IL-27 on the proliferation and differentiation of iNKT cells and Th17 cells. We will further generate imiquimod-induced psoriasis-like skin lesions model in mice, assess the changes of psoriasis lesions, cytokines and chemokines using rIL-27 or anti-IL-27 antibody by multiple subcutaneous injection or by intraperitoneal injection. This study could suggest the possibility of targeting IL-27 for therapeutic treatment of psoriasis.

IL-27属IL-12家族细胞因子，主要作用于固有免疫系统和获得性免疫系统的各种细胞而发挥免疫调节作用，但具体机制不明。我们的前期研究发现银屑病患者外周血单一核细胞（PBMC）和皮损组织中IL-27P28和IL-27EBI3mRNA表达水平下调，IL-17A、IL-21、IL-22mRNA表达水平上调，银屑病PBMC中Th17细胞比例明显升高。鉴于IL-27在银屑病的发病中可能发挥的重要作用，本课题主要研究IL-27对银屑病iNKT细胞和Th17细胞的免疫调节和效应应答的作用。分离外周血幼稚CD4+T淋巴细胞，体外培养，使用IL-27刺激，分析IL-27对上述细胞的激活、增殖分化和免疫调节作用；同时建立咪喹莫特诱导的小鼠银屑病样皮损模型，使用IL-27和抗IL-27单抗治疗，研究银屑病样皮损的发展变化，阐明IL-27在银屑病发生过程中的作用，为临床上靶向治疗提供理论依据。

银屑病是一种免疫介导的角质形成细胞过度增殖的慢性、复发性的炎症性皮肤病，可以累及皮肤、关节、代谢和心血管等多个系统。银屑病的病因复杂，涉及基因、免疫、环境等多种因素，各种固有及获得性免疫细胞特别是各型CD4+辅助性T细胞及其分泌的细胞因子形成复杂的调控网络，调节着银屑病的发病及转归。越来越多的证据表明Th1细胞和Th17细胞在其中发挥关键作用，IL-12家族细胞因子是由抗原提呈细胞等分泌的调节辅助性T细胞增殖和分化的关键环节。.白介素27（IL-27）是近年来发现的由IL-27p28和EBI3组成的异二聚体细胞因子，与IL-12、IL-23同属IL-12家族。研究显示IL-27可以促进naïve T细胞增殖，分化为Th1细胞加重炎症，另一些研究发现IL-27抑制Th17细胞的分化和IL-17等细胞因子的产生。先前的研究发现IL-27在银屑病早期的表达增高，且皮下注射IL-27可以通过诱导Th1和IFN-r的表达加重皮损。那么，IL-27在银屑病中是通过激活Th1发挥的促炎作用起主导还是通过抑制Th17细胞活性的抑制炎症的作用起主导，这些问题需要进一步研究阐明。.本研究搜集25例中重度银屑病患者的外周血和15例患者的皮损组织以及年龄、性别相匹配的健康对照者的外周血和皮损组织，对其进行银屑病皮损面积和严重指数（PASI）评分，并且通过流式细胞术、实时定量PCR技术（real-time PCR）和酶联免疫吸附试验（ELISA）检测发现银屑病患者外周血中IL-27的表达明显低于健康对照者；运用免疫组织化学法、western-blot和实时定量PCR发现在皮损中IL-27及其受体的表达都明显低于健康对照者，WSX-1表达在银屑病和正常对照皮肤组织的表皮全层，同时WSX-1在银屑病的皮损组织的表达明显低于健康对照者。此外，我们构建了咪喹莫特银屑病小鼠模型，发现在炎症后期皮下注射IL-27可以明显减轻银屑病的皮损严重程度和脾脏细胞的Th1和Th17细胞的数量；而在IL-27拮抗剂处理组的小鼠皮损的严重程度明显增加。因此，IL-27在银屑病小鼠中有一定的抑制炎症作用。本研究进一步补充了IL-27在银屑病发病机制中的作用，为银屑病提供了新的治疗思路和新的作用靶点。