基于高效捕捉CTC及DNA胞嘧啶修饰建立术前肝癌微血管侵犯的临床预测模型及效果评价的研究

Microvascular invasion is an important pathological feature of Hepatocellular carcinomar which reflects the early metastasis and invasion ability , is closely related to the poor prognosis after hepatectomy or liver transplantation, and lacks effective preoperative diagnosis method and predictive index at present, seriously affecting the clinical decision. Previous study found that CTC and modified DNA cytosine are related to the portal vein tumor thrombosis (PVTT) and prognosis, but subject to CTC capture and detection sensitivity and specificity of modified DNA cytosine, and there is no study taking CTC and modified DNA cytosine as the predictive indexes of Hepatocellular carcinomar microvascular invasion at present. This study is intended to use the early breakthrough of non-antibody dependent CTC capture technology of cooperating teams based on cancer cell surface charge to realize the efficient capture of CTC of patients with Hepatocellular carcinomar. Meanwhile, further optimize the derivative, improve the detection sensitivity of modified DNA cytosine, and use chemical derivatization and mass spectrometry linked technique to efficiently test the modified DNA cytosine of CTC. By studying the abnormal changes in CTC and modified DNA cytosine, discuss the relationship with Hepatocellular carcinomar microvascular invasion and disease outcome, and establish clinical prediction model, and effect evaluation in combination with clinicopathologic data in order to provide clinical guidance for preoperative prediction of Hepatocellular carcinomar microvascular invasion, individual treatment and prognosis evaluation.

微血管侵犯是肝癌的一个重要病理特征，反映肝癌的早期转移和侵袭能力，和肝切除术或肝移植后的预后差紧密相关，目前缺乏有效的术前诊断方法及预测指标，严重影响临床决策。前期研究发现循环肿瘤细胞（CTC）及DNA胞嘧啶修饰与肝癌门脉癌栓及预后相关，但受制于CTC捕获以及DNA胞嘧啶修饰检测的灵敏度及特异性，目前尚未有将CTC及DNA胞嘧啶修饰作为肝癌微血管侵犯的预测指标的研究。本研究拟利用课题组前期在基于癌细胞表面电荷的非抗体依赖的CTC捕获技术的突破，实现肝癌患者CTC的高效捕获。同时进一步优化衍生物提高DNA胞嘧啶修饰物检测的灵敏性，应用化学衍生化与质谱联用技术高效检测CTC的DNA胞嘧啶修饰物。通过研究CTC及DNA胞嘧啶修饰异常变化，探讨它们与肝癌微血管侵犯及疾病转归的关系，结合临床病理资料，建立临床预测模型，进行效果评价，以期对术前预测肝癌微血管侵犯、个体化的治疗以及预后评估提供临床指导。

肝细胞癌（HCC）是最常见的恶性肿瘤之一，在世界范围内的发病率和死亡率均呈上升趋势。微血管侵犯（MVI）的存在是影响肝癌术后肝外转移的独立危险因素，术前预测HCC的MVI极为重要，是预测复发的关键因素，有助于确定肝切除前的治疗策略或肝移植。然而，由于取样有限，肝活检通常会错过这种组织学特征，并且通常仅在手术和检查全切除标本后才能检测到MVI。目前无法在术前充分确定MVI。同时，临床外科医生面临着如何准确预测肝癌MVI难题，需要有效的肝癌MVI诊断及预测标志物，肝肿瘤来源的细胞因子或感染并发症产生的炎症刺激可以上调细胞粘附分子，从而促进肝癌循环肿瘤细胞（CTCs）附着在门静脉上。肝脏的静脉和肝静脉内皮，存在于血小板和组织中。在炎性因子和各种免疫细胞的作用下形成CTCs细胞簇，有利于血管瘤栓的形成。因此CTCs可能直接参与MVI的发生和发展，对预测患者术前MVI可能有重要的诊断价值。肝癌DNA胞嘧啶修饰是一种重要的表观遗传修饰，存在于许多肿瘤中。研究发现，肝癌组织中DNA胞嘧啶修饰物的含量会显着降低，与肿瘤的生长代谢密切相关。最新研究表明，DNA胞嘧啶修饰及过程与肿瘤发生、发展的调控有关，可作为肿瘤预后的重要标志物。研究发现，肝癌组织中DNA胞嘧啶修饰异常与发生发展密切相关大血管侵犯（门静脉癌栓），也与肝癌的复发转移有关。但DNA胞嘧啶修饰异常，特别是外周血CTCs和DNA胞嘧啶修饰在肝癌患者MVI预测中的作用，有待进一步研究。进一步优化衍生物以提高DNA胞嘧啶膜的检测。它将敏感性化学衍生化和层析质谱技术相结合，检测肿瘤细胞DNA胞嘧啶修饰。通过研究循环肿瘤细胞和DNA胞嘧啶修饰的变化，探讨其与微血管浸润和肝癌疾病转归的关系，对术前预测肿瘤微血管侵犯、个体化治疗和预后评估，手术及临床决策具有重要意义。