戊型肝炎病毒CDNA基因疫苗的研究

本研究采用分子克隆、基因重组、真核基因表达等分子生物学技术，构建了戊型肝炎病发病毒六个不同基因片段的重组疫苗，比较了PCDNA3、VR1012、PJW4303、PMEMneo、PSVEL等真核质粒对HEV不同基因片段的表达效果。对所构建的DNA疫苗进行了股四头肌、径脱前肌、皮下及单点和多点等不同部位，不同注射方法的DNA疫苗免疫效果比较。用本室研制的HEV合成肽试剂盒检测，抗体水平较低。为提高DNA疫苗的免疫水平，用免疫刺激信号 B72和白细胞介素2（IL-II）分别各免疫两批小鼠，但试验组与不加B72及IL-II组的免疫水平无显著性差异。用所构建的PCD964和PJWORF2 400基因重组DNA疫苗免疫国产猕猴，抗体水平也未见明显升高。为解决DNA疫苗免疫小鼠和猕猴的检测问题，我们构HEV2.1、HEV全长和HEVORF3的重组杆状病毒，工转染SF9昆虫细胞，表达了HEV的重组蛋白，基鉴定和检测工作正在进行中。