二乙基亚硝胺诱发大鼠形成肝癌雌激素保护作用机制以及维生素D类似物治疗研究

肝细胞癌（简称肝癌）发病率男性显著高于女性。前期研究发现，采用二乙基亚硝胺(DEN)诱发大鼠形成肝癌，雌性成瘤率约为30%，雄性则为100%，并伴有更高的肺转移率。临床研究发现，与无癌栓有包膜的标本相比，有癌栓无包膜的标本低表达雌激素受体（ER）、高表达缺氧诱导因子(HIF-1α)。在不同转移潜能人肝癌细胞系中，ER表达随着转移潜能的升高而下降。进一步采用信号转导基因Oligo芯片检测雄性和雌性大鼠肝癌标本中基因的异常表达，初步结果显示肝细胞生长因子（HGF）明显上调。上述研究表明ER与肝癌的发生发展密切相关，推测其作用机制可能与HGF有关。本课题拟采用卵巢切除雌性大鼠模型，应用PCR基因芯片等方法，研究HGF、HIF-1α在DEN诱导下高表达的机制以及HGF高表达对肿瘤生物学特性的影响，验证维生素D类似物对雌激素受体、脯氨酰羟化酶2的调节作用，探索其预防肝癌发生发展的有效性和可行性。

肿瘤转移仍旧是最终攻克肝细胞癌（简称肝癌，HCC）所面临的主要挑战之一。近年来的研究显示雌激素在肝癌的发展和进展中起着重要的作用，但其是否减少以及如何减少肝癌的转移仍旧不甚明了。课题组通过研究雌激素对DEN诱发大鼠原发性肝癌发生转移影响，雌激素对肝细胞生长因子（HGF）、白细胞介素-6（IL-6）等生长因子和细胞因子的表达分布影响，ERα、P-ERα、HGF和IL-6在乙肝相关性肝癌组织中的表达及临床意义，ERα、p-ERα、NF-κB p65和MMP-9的表达与肝癌侵袭的相关性，ERα、p-ERα、NF-κB p65和MMP-9在不同转移潜能肝癌细胞中表达的差异，维生素D类似物EB1089对肝癌MHCC97-H细胞生物性特性的影响，维生素D类似物EB1089对ERα、NF-κB p65和MMP-9的影响，维生素D类似物EB1089对肝癌SMMC-7721细胞生长的影响，维生素D类似物EB1089对肝癌SMMC-7721细胞中FACL3和FACL5表达影响，维生素D类似物EB1089对皮下移植瘤生长的影响，缺氧诱导因子-1α(HIF-α)与上皮型钙黏素（E-cadherin）在肝癌中的表达及其意义。研究表明雌激素能显著抑制肝癌的生成、发展和转移；雌激素保护肝癌发生、生长及转移的机制与ERα、P-ERα、HGF和IL-6有关，雌激素可能通过作用于ERα下调HGF和IL-6的表达以改善肝组织炎症微环境从而抑制肝癌的发生、生长和转移；ERα阳性肝癌患者肿瘤生物学特性以及预后较阴性患者好，ERα在肝癌中的作用可能与IL-6相关；雌激素受体及其相关炎症因子影响肝癌的转移；ERα、p-ERα、NF-κB p65和MMP-9与肝癌转移潜能相关；EB1089可能通过ERα途径抑制肝癌细胞的增殖、侵袭迁移，诱导其凋亡；EB1089可能通过下调FACL5的表达从而抑制肝癌细胞的生长增殖；HIF-1α、E-cad-herin异常表达与肝癌进展及转移密切相关，HIF-1α及E-cadherin有望作为肝癌恶性潜能判断的重要参考指标。总的研究结果显示HGF和IL-6在ERα对肝癌保护作用中扮演了重要的角色，维生素D类似物EB1089可能成为防治肝癌的新方法。这些研究结果将有助于加深对肝癌侵袭、转移及其分子机制的理解，可能为临床预防和治疗肝癌提供一些新的思路。