骨髓基质干细胞向视网膜神经节样细胞分化中支配基因筛选及其研究

以大鼠作为实验动物，通过诱导剂与视网膜细胞条件分化液诱导骨髓基质干细胞(BMSCs)向视网膜神经节样细胞分化。经免疫组织化学方法证实已分化为目的细胞后，收集自BMSCs始至分化为视网膜神经节样细胞之间各阶段细胞。同时收集体外培养的大鼠原代视网膜神经节细胞(RGCs)。用分子筛、离子交换柱分离出上述几组细胞内的总蛋白，获取不同分子量、不同pH值蛋白质组份。用具有不同化学修饰表面的蛋白芯片与上述蛋白质结合，同时行双向电泳，获得差异性蛋白。选取可做为BMSCs向视网膜神经节样细胞分化不同阶段的特异性蛋白质及与成熟RGCs相同的表达蛋白质，经质谱分析确认其氨基酸序列，并推导出其基因结构进行分析。从而发现在上述细胞分化过程中的标志蛋白及其编码基因，为探讨应用转基因技术诱导BMSCs向视网膜神经节样细胞定向分化，并将其应用于眼科临床奠定坚实的理论及前期工作基础。