SNX25通过CD44作用环节影响肿瘤细胞转化及放化疗后复发

本研究组在前期受国家自然科学基金的资助，首次克隆了重要的信号通路调节蛋白SNX25，发现其不但可以通过促进TGF-b受体的降解而调节相关的信号通路活性，而且可以抑制肿瘤细胞在特定培养条件下的细胞球生成，并且发现该作用与CD44与TGFBRI/II的相互结合有关，提示SNX25可以抑制肿瘤干细胞的表型、SNX25与CD44二者的平衡状态在肿瘤干细胞的生成中可能发挥一定作用。.本项目拟在前期工作的基础上，系统研究SNX25和CD44分子功能状态与肿瘤干细胞形成和相关表型的关系，探讨化放疗后复发肿瘤细胞中的SNX25和CD44表达水平的变化及通过CD44单克隆抗体和脂质体-SNX25表达质粒复合物纳米颗粒抑制肿瘤复发的可能性，以期为全面认识SNX25在肿瘤干细胞生成中的作用及开辟降低肿瘤复发的新途径提供理论和实验依据。

肿瘤干细胞被定义为具有自我复制能力及分化潜能，能够维持肿瘤生长的数量极少的亚群，对化疗和放射治疗具有较强的抵抗作用。多项研究证实，肿瘤干细胞在血液系统肿瘤和实体瘤中广泛存在，是造成肿瘤临床复发的重要因素。由于肿瘤干细胞只占肿瘤细胞的极小比例，因此鉴定十分困难。. 常见的肿瘤干细胞分子标志物有CD44、CD133、ALDH等。p53基因在肿瘤中经常发生突变并引起CD44的表达增加，与此同时分选连接蛋白(sorting nexin) SNX25的失活所造成的TGF-Β信号活化具有协同作用。. 本研究试图通过构建和筛选CD44+/TGF-β+双阳性细胞系，制备荷瘤动物模型，使用H4C4抗体和SNX25表达质粒转运系统，阐述CD44和SNX25分子在肿瘤发生和发展中对肿瘤干细胞的协同作用，特别在放化疗杀伤后存活的干细胞中的表达和活化的调控机制。. 结果显示，CD44通常在肿瘤细胞中高表达，部分胰腺肿瘤高表达组患者的生存期显著少于低表达组（10个月VS 43个月，p=0.005）。研究表明在CD44阳性的肿瘤细胞中其他肿瘤干细胞标记分子阳性的比例显著升高，并且在放化疗治疗后复发的肿瘤中进一步升高，可能是治疗后复发的重要机制。. 结果显示，SNX25作为分选链接蛋白家族的重要成员，通过与跨膜受体TGF-βR相互作用介导其内吞并促进降解，从而起到抑制TGF-β下游信号通路的作用。SNX25在正常组织中普遍存在，而在肿瘤细胞中经常缺失。. 通过在CD44阳性细胞系中控制SNX25的表达可以改变肿瘤干细胞的比例，进而影响其形成细胞微球和动物接种后的成瘤能力。进一步研究发现SNX25在CD44阳性细胞中影响肿瘤干细胞功能的机制可能与其调节TGFb受体蛋白的跨膜转运从而影响下游的信号转导有关。. 使用H4C4抗体及SNX25表达质粒处理CD44阳性细胞可有效地降低其肿瘤干细胞标记物ALDH、CD133及相关基因Nanog, Sox2,Rex1的表达水平，并抑制肿瘤细胞在动物体内外的生长。与此同时，在荷瘤动物经放化疗治疗后给以H4C4抗体和SNX25质粒转运系统治疗，可以有效减少复发。. 以上发现对CD44和相关调节蛋白在肿瘤干细胞在肿瘤发生和发展中的作用机制加深了了解，并可能进一步探索肿瘤治疗，特别是降低放化疗后复发的有效方法提够了有效的途径