基因工程单链抗体用于消化道癌放射免疫引导外科

利用pCANTAB5E噬菌体表达载体在大肠杆菌HB2151中表达了可溶性的抗人结肠癌单链抗体CL-3，主要存在于培养上清。利用质粒表达载体pjw2和PET5a分别在大肠杆菌DH5a和BL21（DE3）中以包涵体形式表达了CL-3 scFv，并对包涵体蛋白的变性复性和抗体纯化过程对抗体活性和得率的影响进行研究。SDS-PAGE证明表达蛋白的分子量为27KD左右，ELISA证明其能特异性与CEA结合，免疫活性与新代抗体相似。免疫组化鉴定表明scFv CL-3可与胃肠道癌细胞抗原特异性结合，大部分细胞呈现阳性反应，而间质为阴性反应。本研究为提高scFv的表达效率，大量获得用于肿瘤诊断和治疗的单链抗体提供了理论依据和技术资料。