硒结合蛋白1（SBP-1）在猪卵泡生长发育过程中表达调控机制的研究

硒结合蛋白1（SBP-1）对卵巢的健康有重要作用，但其在卵巢中的表达调控和作用目前还不清楚。本研究将对SBP-1在猪卵巢组织中的表达状况进行检测，确定其在卵泡生长发育过程中的表达特异性。然后，通过对人和猪的多种卵巢细胞（包括卵母细胞）进行药物处理实验（使CREB下游基因转录激活或抑制），研究SBP-1在卵巢中的表达是否受到CREB的调控，以及调控方式。随后，我们将运用cDNA稳定转染和RNA干扰，分别上调和下调SBP-1的表达，观察体外培养的猪COCs的状态，监测卵母细胞体外成熟进程是否正常。最后，我们将对具有SBP-1高表达和低表达的猪COCs进行相关基因表达谱研究，解析卵泡生长发育相关的SBP-1信号网络。总之，本研究将在分析SBP-1表达调控的基础上，探索SBP-1的作用机制以及它对卵巢健康和卵泡生长发育的意义，期望为阐明卵巢癌发病机制和改善动物繁殖效率提供一定的分子基础。

硒结合蛋白1（SBP-1）对卵巢的健康有重要作用，但其在卵巢中的表达调控和作用目前还不清楚。本研究首先对SBP-1在猪卵巢组织中的表达状况进行检测，确定其在卵泡生长发育过程中的表达变化规律。然后，申请人通过分析和验证转录因子CREB在猪卵巢细胞中的染色体免疫共沉淀和测序数据，我们发现SBP-1确实是转录因子CREB调控的下游靶基因。另外，我们也发现SBP-1在猪卵泡中的表达调控很可能与CREB蛋白133位丝氨酸磷酸化的发生相关。接下来，我们进一步通过药物（forskolin）刺激促进CREB蛋白133位丝氨酸磷酸化，进而激活SBP-1基因表达。结果显示，药物刺激确实使CREB蛋白133位丝氨酸磷酸化和SBP-1在体外培养COCs中的表达有所提高。而且，这种刺激可以有效的促进猪卵母细胞在体外的成熟过程。另外，我们还通过药物（KG-501）处理抑制CREB丝氨酸133位磷酸化的作用，导致SBP-1在体外培养COCs中的表达明显下调。而且，这种抑制作用使体外培养COCs的状态出现了明显的异常，其中达到GVBD 期的卵母细胞的比例显著下降。以上这些数据表明，CREB蛋白133位丝氨酸磷酸化的调控在卵母细胞成熟过程中发挥着重要的作用，提示我们CREB蛋白133位丝氨酸磷酸化对SBP-1的表达的调控可能是卵母细胞成熟过程中的重要分子互作，对卵泡的生长发育具有重要意义。总之，本研究在分析SBP-1表达变化规律的基础上，探索了SBP-1的调控机制以及它对卵巢健康和卵泡生长发育的意义，为阐明卵巢癌发病机制和改善动物繁殖效率提供一定的分子基础。