卵巢癌早期免疫诊断标志物的鉴定、筛选和评价

卵巢癌是女性常见的恶性肿瘤之一，早期症状体征不明显，又缺乏早期诊断方法，致使70%左右的患者初诊时已属晚期，失去彻底治疗的机会。尽管有一些肿瘤标志物如CA125等可用于卵巢癌的诊断，但敏感性和特异性均不高，尤其是对卵巢癌早期诊断价值不大。鉴于此，探索和发现敏感和特异的卵巢癌早期诊断标志物具有重要的临床价值和意义。以往研究表明肿瘤病人血清中存在有各种类型的抗细胞自身抗原的抗体，这些与肿瘤发生有关的抗原被称为肿瘤相关抗原(TAA)。可以假设出现在卵巢癌病人血清中的自身抗体反应是机体针对参与卵巢上皮细胞癌变过程中的一些细胞内抗原的免疫反应。本课题在以前研究工作的基础上，采用cDNA文库筛选和蛋白质组学技术鉴定卵巢癌相关肿瘤抗原，设计针对卵巢癌特异的肿瘤相关抗原组合，并对其作为卵巢癌早期免疫诊断标志的可行性进行评价，从而为建立一种新的卵巢癌早期体外非侵入性免疫诊断技术提供理论依据。

卵巢癌是女性生殖器官常见的恶性肿瘤之一，缺乏有效的早诊方法，探索发现敏感特异的卵巢癌早诊标志物具有重要的临床价值和意义。肿瘤病人血清中存在有各种类型的抗细胞自身抗原的抗体，这些与肿瘤发生有关的抗原被称为肿瘤相关抗原(TAA)。可以假设出现在卵巢癌病人血清中的自身抗体反应是机体针对参与卵巢上皮细胞癌变过程中的一些细胞内抗原的免疫反应，因此对血清中存在的抗-TAA抗体的检测可以用于肿瘤的早期诊断和预后评价。在前工作基础上，采用蛋白质组学技术鉴定卵巢癌相关肿瘤抗原，从编码这些抗原的基因水平和蛋白水平进行了相关研究，进一步运用系统综述和荟萃分析的方法，设计针对卵巢癌特异的TAA组合，对其作为卵巢癌早期免疫诊断标志的可行性进行全面评价。.卵巢癌早期免疫诊断标志物（TAA）的筛选和鉴定：western blot、双向凝胶电泳分离卵巢癌和正常人血清中表达的蛋白，在卵巢癌血清中，分子大小在37KDa-50KDa之间的条带比例较高；质谱分析明确了2个差异表达蛋白。.TAA IMP1 和p62/IMP2在卵巢癌中的免疫诊断及在肝癌细胞系中的定位：ELISA技术检测IMP1 和p62/IMP2自身抗体在卵巢癌患者和正常人血清中的表达，患者中抗体阳性率明显高于正常人；免疫荧光实验检测二者在 HEp-2细胞中的定位，均为胞浆阳性。.卵巢癌TAA的表达和蛋白纯化：利用原核表达技术和相关蛋白表达纯化技术，构建三种蛋白的表达质粒，进行后续的蛋白表达和纯化，成功获得Koc、C-myc、HCC1 三种纯化蛋白。.卵巢癌TAA的系统筛选及在卵巢癌中的诊断价值：利用系统综述方法，对卵巢癌相关抗原研究汇总，有60篇公开发表论文、113个TAA及自身抗体纳入分析中，进行优化组合，分别利用6种和12种TAA联合对卵巢癌的诊断价值进行评价，验证了抗TAA自身抗体联合检测确实能够提高卵巢癌的诊断价值，对卵巢癌术后病情监测和预后评价也有一定参考价值。.到目前为止还没有一种药物能够从根本上彻底治愈肿瘤，要达到临床基本治愈癌症或者延长病人的生命，唯一的办法就是早发现、早诊断和早治疗，即“三早措施”。因此如何能够对包括卵巢癌在内的所有癌症病人进行早期诊断已成为各国肿瘤学研究者重点探索和研究的课题。本研究的实施，为建立一种新的卵巢癌早期体外非侵入性免疫诊断技术和手段提供了科学依据和资料。