重组腺病毒ad-LIGHT-HBs在小鼠肝炎模型中治疗作用的研究

Chronic hepatitis B is often associated with chronic liver disease that can lead to the development of cirrhosis and hepatocellular carcinoma (HCC).Current treatments of hepatitis B are mainly based on IFNs and nucletide analogs which do not clear HBV but suppresses HBV replication inside cells instead.The adaptive immune response, especially viral specific T cell is thought to be responsible for viral clearance.But some viral proteins (i.e. HBsAg) induce T cell tolerance and contribute to virus persistancy. In this study, we construct an novel HBV therapeutic vaccine which express co-stimulating molecules, LIGHT, and HBsAg by adenovirus vector.In this vaccine, HBs provides first signal and LIGHT provides second signal. Co-expression of LIGHT and HBsAg on the same cell can induce HBs-specific T cell. We have proved that in wild type C57/BL6 mice this vaccine can strongly induce HBs-specific CTL. In this proposal, we will study therapeutic effects of ad-LIGHT-HBs in chronic hepatitis B mice model as well as the underlying cell and molecular mechanisms.

慢性乙型肝炎是导致原发性肝癌和肝硬化最重要因素。目前慢性乙型肝炎的治疗方案主要包括干扰素治疗和核苷类似物治疗，这些治疗方案主要是通过抑制病毒复制来改善临床症状及预后，并不能彻底清除病毒。病毒特异性的T细胞在清除病毒方面发挥了重要的作用。HBV 表达的某些蛋白（如，HBsAg）诱导病毒特异性T 细胞免疫耐受是导致病毒持续存在的一个重要原因。本项目中，我们制备了一种新型治疗性乙肝疫苗adeno-LIGHT-HBs，此疫苗通过腺病毒载体表达免疫调节分子LIGHT 和乙肝表面抗原HBsAg。乙肝表面抗原可以提供免疫活化第一信号，LIGHT分子提供免疫活化第二信号，LIGHT分子和HBsAg共表达于同一个细胞可以有效活化免疫系统。我们已经证明该疫苗在野生型C57/BL6小鼠体内可以有效活化免疫系统，产生HBs特异性的T细胞。本项目中，我们拟研究此疫苗在小鼠慢性肝炎模型中的治疗作用和潜在的细胞分子机制

慢性乙型肝炎是导致原发性肝癌和肝硬化最重要因素。目前慢性乙型肝炎的治疗方案主要包括干扰素治疗和核苷类似物治疗，这些治疗方案主要是通过抑制病毒复制来改善临床症状及预后，并不能彻底清除病毒。病毒特异性的T 细胞在清除病毒方面发挥了重要的作用。HBV 表达的某些蛋白（如，HBsAg）诱导病毒特异性T 细胞免疫耐受是导致病毒持续存在的一个重要原因。本项目中，我们制备了一种新型治疗性乙肝疫苗adeno-LIGHT-HBs，此疫苗通过腺病毒载体表达免疫调节分子LIGHT 和乙肝表面抗原HBsAg。乙肝表面抗原可以提供免疫活化第一信号，LIGHT 分子提供免疫活化第二信号，LIGHT 分子和HBsAg 共表达于同一个细胞可以有效活化免疫系统。本项目中，我们研究了此疫苗在正常小鼠和慢性肝炎模型小鼠中的免疫学特点，adeno-LIGHT-HBs在慢性肝炎模型小鼠具有一定治疗作用，导致血清HBsAg和HBeAg下降，但是不能彻底清除血清HBsAg和产生HBsAg特异性的抗体，从而实现彻底治愈乙肝的目的。在研究过程中，我们发现HBV感染之后可以引起对乙肝疫苗的不反应性，这种不反应性与血液循环中长时间、大量存在的抗原直接相关。基于这个发现，设计了通过抗体清除病毒抗原，恢复免疫应答能力，联用疫苗的免疫调节治疗方案，研究结果发现：在免疫耐受原清除的情况下机体恢复了对疫苗刺激的正常反应，产生了病毒特异性的体液应答和细胞应答，该应答反应有效控制了病毒复制，达到了临床治愈慢性乙肝的目的。该研究阐明了病毒分泌的耐受原是HBV感染导致并维持免疫不应答状态一种免疫学机制，同时证明了通过中和性抗体清除免疫耐受原可以逐步恢复免疫系统对疫苗的应答能力，产生病毒特异性的免疫应答反应，实现临床治愈慢性乙肝。本研究发现为治愈慢性乙肝提供一种可能性，具有潜在的临床应用价值。