连翘清热解毒药效物质基础的“谱证动力学”研究

本课题拟以连翘为模型药，以中药对证治疗为理论指导，系统性发挥疗效为特点，在保证其"有效性"基础上，立足于连翘成分组胃肠道动力学过程，利用中药指纹图谱联合动力学过程建立"谱证动力学"模型，筛选连翘药效物质基础。首先采用LC-MS-MS建立化学指纹图谱，通过大鼠原位实验模型初步了解连翘的代谢及吸收动力学过程以筛选连翘药效物质基础。然后通过Caco-2细胞模型和MDCKII细胞模型，进一步研究连翘药效物质基础的代谢以及吸收机理。最终，建立大鼠热证模型以及正常动物模型，通过静脉和口服给药，比较不同证型大鼠的体内动力学过程差异。结合连翘的血清化学指纹图谱筛选连翘的药效物质基础，验证大鼠原位实验模型及细胞模型实验结果。从细胞水平、器官水平和整体动物水平多层次，多角度的探索中药物质基础研究的崭新途径，建立药效物质基础的"谱证动力学"的系统性筛选模型，从而为中药物质基础筛选提供新思路与新方法。

中医药是在辨证论治的理论指导下整体发挥疗效的科学，而大多数中药为口服给药，必须进入体内才能发挥疗效。因此本项目以连翘为模型药，以中药对证治疗为理论指导，系统性发挥疗效为特点，在保证其“有效性”基础上，立足于连翘成分组胃肠道动力学过程，利用中药指纹图谱联合成分组动力学过程建立“谱证动力学”模型，筛选连翘药效物质基础。首先建立连翘化学指纹图谱，并采用化学指纹图谱对其药材提取工艺进行优化以及建立连翘的质量标准。连翘静脉给药后在体内分布迅速，连翘苷和连翘酯苷半衰期分别为21～27min 和20～24min，呈现线性药动学过程。连翘灌胃以后，连翘苷和连翘酯苷吸收较少，血药浓度较低，且尿中和粪便中的排泄量都比较少，考虑在肠道内进行代谢转化吸收进入体内起效。热症动物模型会延长连翘在体内的半衰期，增加其作用时间。Caco-2细胞模型和MDCKII细胞模型研究表明连翘苷的转运受到MDR1转运载体抑制而Bcrp1和MRP2抑制连翘酯苷的主动转运过程。大鼠在体实验验证了整体实验和细胞实验的结果。项目从细胞水平、器官水平和整体动物水平多层次，多角度的探索中药物质基础研究的崭新途径，建立药效物质基础的“谱证动力学”的系统性筛选模型，从而为中药物质基础筛选提供新思路与新方法。