CRHR1对临产前后子宫肌收缩性的调节发生逆转的分子机制

人类分娩启动的机制尚未阐明，促肾上腺皮质激素释放激素（CRH）在分娩启动中发挥重要作用，但其具体机制如何尚不清楚。我们的前期研究表明CRH对规律性宫缩性发生（即临产）前后子宫肌收缩性的调节不同：在临产前CRH可以抑制子宫肌收缩，而在临产后CRH能够易化收缩，而且临产前后CRH的作用都是由其I型受体(CRHR1)介导,说明临产前后CRHR1的作用发生逆转。在此基础上，本项目拟进一步研究临产前后CRHR1偶联的Gα亚基类型是否发生改变，以及其激活的细胞信号转导通路是否不同；研究Gβγ是否在CRH调节子宫肌收缩性中发挥作用，及其可能的效应器；并进一步探讨导致临产前后子宫肌CRHR1偶联的G蛋白类型发生改变的可能机制。通过上述研究阐明由CRHR1介导的CRH对临产前后人子宫肌收缩性调节作用发生逆转的分子机制，有助于揭示妊娠子宫由静息转为收缩的可能机制，还可为早产的防治提供新的作用靶点。

人类分娩启动的机制尚未阐明，促肾上腺皮质激素释放激素（CRH）在分娩启动中发挥重要作用，但其具体机制如何尚不清楚。本项目第一部分的研究发现CRH对临产前后子宫肌细胞内[Ca2+]i具有不同的调节，对未临产子宫肌CRH可通过CRHR1，激活Gs-cAMP-PKA信号通路降低[Ca2+]i；而对临产子宫肌CRH也是通过作用于CRHR1，但是通过激活Gi和Gq-PLC-IP3这两条细胞内信号通路发挥升高临产子宫肌细胞[Ca2+]i的作用。第二部分的研究发现人临产子宫肌中炎性因子和趋化因子含量明显高于未临产子宫肌。在原代培养的人子宫肌细胞中，CRH能明显促进炎性因子和趋化因子的生成，此作用是由CRH与CRHR1作用，激活AC/PKA和NF-κB细胞内信号通路产生。培养的子宫肌细胞产生这些因子的能够趋化单核细胞，并进一步促进炎性因子、趋化因子以及前列腺素的生成，从而产生正反馈效应，使得子宫肌局部产生炎症反应。而且产生的炎性因子能够进一步促进子宫激活相关蛋白的表达，促进子宫肌由静息态向收缩态的转变。.PGF2a在人类妊娠分娩的过程中发挥重要作用，我们还研究了PGF2a对子宫激活相关蛋白CX43，PTGS2和OTR表达的调节及其细胞内信号通路。这部分的研究发现PGF2A能够调节子宫激活相关蛋白CX43，PTGS2和OTR的表达，而且PGF2A是通过不同的细胞内信号通路促进上述子宫激活相关蛋白的表达。PGF2a促进CX43表达是通过PLC和PKC信号通路发挥作用，ERK, P38和NFkB抑制剂能够阻断，但是PI3K和calcineurin/NFAT抑制剂则不能阻断PGF2a促进CX43的作用，PLC, PI3K, P38和 calcineurin/NFAT信号通路参与，而PKC和NFkB信号通路不参与PGF2a促进PTGS2和OTR表达的过程。