α-SMA特异性磁共振纳米分子探针的制备及其在肝纤维化非创伤性诊断中的应用研究

肝纤维化的无创性诊断，特别是早中期的诊断一直是难点，分子影像学的发展为我们提供了新的思路：结合特异性抗体的纳米磁微粒，通过抗原抗体反应在肝内与代表纤维化进展的抗原结合，进而在MR上显像，为肝纤维化的诊断及评估提供实时依据。为此，首先我们制备并纯化肝星状细胞特异性标志物α-SMA的单克隆抗体；随后将该单抗与USPIO纳米颗粒藕连，获得针对α-SMA的特异性分子探针；在体外验证分子探针与肝星状细胞的结合能力及毒副作用；制备的分子探针从实验性肝纤维化动物模型静脉注入体内后MR成像，以肝组织病理检查及血清学检测为参考，评价分子探针在各肝纤维化阶段诊断的应用价值。本项目旨在探索一种肝纤维化的MR分子影像新技术，为肝纤维化的特异性非创伤性诊断奠定实验基础。

本课题旨在用分子影像学的方法探索肝纤维化的无创性诊断，为肝纤维化的早期诊断提供新的诊断思路。首先我们将肝星状细胞特异性标志物α-SMA的单克隆抗体与USPIO纳米磁微粒偶联，获得针对α-SMA的特异性分子探针；在体外验证分子探针与肝星状细胞的结合能力及毒副作用；制备的分子探针从实验性肝纤维化动物模型静脉注入体内后MR成像，以肝组织病理检查及血清学检测为参考，评价分子探针在各肝纤维化阶段诊断的应用价值。实验结果表明α-SMA在大鼠肝纤维化四氯化碳模型的不同阶段表达具有差异，随着肝纤维化程度的增加而表达增加。α-SMA-USPIO探针在体内能通过免疫反应与抗原特异性靶向结合，并最终在核磁共振中显像。因此结合α-SMA特异性抗体的纳米磁微粒，通过抗原抗体反应在肝内与代表纤维化进展的抗原特异性靶向结合，进而在MRI上显像，为肝纤维化的诊断及评估可以提供了实时依据。