低氧调控的BDNF表达神经干细胞缺氧预处理后移植对脑缺血损伤治疗作用的研究

神经干细胞移植是最具潜能的修复脑缺血损伤的措施，但脑缺血后的营养支持缺乏、氧化应激、组织坏死产物和炎症反应以及宿主对移植细胞的免疫反应将导致植入的细胞死亡。因此，增加植入神经干细胞的存活是发展以干细胞为基础的损伤细胞替代治疗的关键。本项目在已构建低氧调控的BDNF表达载体的基础上，采用细胞培养、免疫荧光、RT-PCP、Western blot、激光共聚焦扫描成像、磁共振成像等方法，通过细胞实验，研究低氧调控的BDNF表达神经干细胞在不同处理条件下的生长、增殖、分化、凋亡情况，探索该细胞的最佳缺氧预处理条件和保存条件；通过动物实验，研究缺氧预处理低氧调控的BDNF表达神经干细胞，于局灶性脑缺血后不同时间、经不同途径移植后在大鼠脑内的存活、增殖、分化以及对脑缺血损伤的修复作用和机制，评价其治疗的安全性。为发展治疗脑缺血损伤的干细胞产品和新方法提供依据。

神经干细胞移植是最具潜能的修复脑缺血损伤的措施，但脑缺血后的组织结构塌陷、营养支持缺乏、氧化应激、组织坏死产物和炎症反应以及宿主对移植细胞的免疫反应将导致植入的细胞死亡。本项目在已构建低氧调控的BDNF表达载体的基础上，采用细胞培养、免疫荧光、RT-PCP、Western blot、激光共聚焦扫描成像、磁共振成像等方法，通过细胞实验，研究了神经干细胞在正常和低氧条件下的生长以及wnt信号通路的作用，探讨了红景天对低氧培养的成年大鼠SVZ神经干细胞凋亡的抑制作用和机制。摸索了Ad5HRE-BDNF转染培养的新生大鼠神经干细胞的条件，构建了低氧反应元件调节的神经营养素-3逆转录病毒载体。研究了制备的N-羧乙基壳聚糖/氧化海藻酸钠水凝胶对神经干细胞的毒性作用和对神经干细胞增殖、分化的影响。进行了MIRB示踪神经干细胞（NSCs）的研究，发现了MIRB标记神经干细胞且不影响其活性和增殖、分化能力的最佳浓度。研究了静脉麻醉剂氯胺酮对神经干细胞的毒性作用和米诺环素对氯胺酮诱发的神经干细胞毒性的保护作用和机制；通过动物实验，研究了大鼠出生前和出生后脑发育过程中神经干/祖细胞和微血管的空间关系，探索了雌激素、自由基清除剂对大鼠脑缺血的保护作用和对脑缺血后神经发生的影响，证实了低氧反应元件调节的神经营养素-3表达对脑缺血损伤的保护作用，研究了CEC/OSA水凝胶复合丝素纳米纤维负载NSCs移植对大鼠脑缺血损伤治疗作用。主要研究结果发表于Scientific Reports(IF: 5.23), Frontiers in Molecular Neuroscience(IF: 5.15), ASN Neuro (IF: 4.36), Neuroscience(IF: 3.23), Int J Dev Neurosci(IF: 2.69)等杂志，培养博士生3名，硕士生4名，为发展治疗脑缺血损伤的新方法提供了重要依据。项目执行期间获陕西省科学技术二等奖1项，所带领的团队先后获西安交通大学创新团队和陕西省重点科技创新团队。