自噬在PDGFA/PDGFB差异性调控PDGFRA的机制研究及对胶质母细胞瘤的影响

Human glioblastoma is the most malignant glioma in astrocytic tumors, which seriously harms human health, and autophagy plays an important role in it. Our group found that autophagy significantly influences the expression of PDGFRA, a key molecule that mediates the main features of proneural-like glioblastoma, and this effect is significantly different in PDGFA/PDGFRA and PDGFB/PDGFRA pathways. In this project, based on this study, the downstream binding protein complexes of PDGFRA stimulated by PDGFRA/PDGFB were analyzed, and the key acetylated regulatory proteins regulated by PDGFRA were screened to reveal the effect of acetylated regulatory proteins on autophagy status and autophagy related genes. The effects of autophagy on PDGFRA downstream binding protein complexes, signal transduction, and eventual glioblastoma cell growth and invasion were determined. This study first investigated the differential regulation of PDGFRA and PDGFB by PDGFRA and its interaction with autophagy, providing a theoretical basis for the discovery of new drugs and new strategies for the diagnosis and treatment of glioblastoma.

人胶质母细胞瘤是星形细胞肿瘤中恶性程度最高的胶质瘤，严重危害人类健康，而自噬在其中发挥着重要的作用。本课题组研究发现自噬显著影响介导Proneural类胶质母细胞瘤主要特征的关键分子——PDGFRA的表达，且这种作用在PDGFA/PDGFRA和PDGFB/PDGFRA两条通路中具有明显差异，本项目拟在此研究基础上，通过蛋白结合组学分析PDGFRA受PDGFA/PDGFB刺激后下游结合蛋白复合物，筛选PDGFRA调控的关键乙酰化调控蛋白，揭示乙酰化调控蛋白对自噬状态的影响以及影响的自噬相关靶点，确定自噬对PDGFRA下游结合蛋白复合物、信号转导以及最终对胶质母细胞瘤细胞生长和侵袭的影响。本研究首次探讨了PDGFRA受PDGFA以及PDGFB差异性调控及其与自噬的相互作用，为揭示胶质母细胞瘤治疗预后的新药物和新的诊治策略提供理论基础。

来自TCGA数据库分析和体内小鼠模型的大量证据表明，PDGFA在GBM的发生发展中具有重要作用。目前为止，PDGFRA是唯一被确定的PDGFA的受体。然而，在TCGA_GBM数据库中，PDGFA和PDGFRA分别是Proneural和Classical亚型GBM的标志物。我们在此的数据进一步表明，PDGFRA的活性或表达缺失并不能有效地阻断PDGFA的功能。因此，PDGFRA对于PDGFA的功能发挥可能不是必需的。为了分析参与PDGFA功能的蛋白，我们进行了免疫共沉淀和质谱分析，并首次描绘了PDGFA相关蛋白的网络。出乎意料的是，数据显示，即使没有激活PDGFRA和AKT，EPHA2也可以被PDGFA短暂激活。而且，质谱分析、免疫共沉淀、体外结合热力学和邻近连接实验一致证明了EPHA2和PDGFA的相互作用。另外，我们在TCGA_GBM数据库和临床GBM样本中观察到EPHA2的高表达导致PDGF信号通路靶基因的上调。与其他情况相比，PDGFRA和EPHA2的共同上调导致更差的患者预后和更差的治疗效果，这可能是由于与恶性分子亚型和侵袭性生长相关的基因表达升高所致。由于PDGFA可以通过激活EPHA2发挥作用，用抑制剂阻断PDGFRA不能有效抑制GBM细胞增殖，但同时抑制EPHA2和PDGFRA在体外和体内对GBM细胞都显示出协同抑制作用。.综上所述，我们的研究为PDGFA功能提供了新的见解，并揭示了EPHA2是PDGFA的潜在受体。EPHA2可能与PDGFRA共同参与PDGFA信号转导，并介导GBM细胞对PDGFRA抑制剂的抵抗。因此，联合靶向PDGFRA和EPHA2的抑制剂代表了治疗GBM的一种有前景的治疗策略