PhLP3、PFDN在伴侣蛋白CCT促进的大肠癌浸润转移中的作用及机制

Cytoskeleton plays a important role in cancer cell invasion, the transformation of some skelemins(eg: F-actin & Tubulin) can enhance the motobility of cancer cell during the process of tumor metastasis. CCT was a cruical protein which can mediate the flod of neo-skelemins. In previous study, we have known that CCT6A was over-expressed in colorectal cancer tissues, and greatly influenced the proliferation, motobility and the cytoskeletonic system of cancer cell, but the mechanism was unclear. Some studies have found that PhLP3 & PFDN could combined with CCT and help it mediating the fold of Actin & Tubulin; In previous trials, we have found that PhLP3 and PFDN were also over-expressed in colorectal cancer tissues.So in this study, we expect to prove the interaction between CCT and PhLP3 & PFD, and verify the machanism of mediating the fold of cytoskeleton; observe the variances of expression of PhLP3 & PFD in cancer cell and the subsequent influence on form and function of cytoskeletonic system; detect the expression of PhLP3 & PFD in colotectal cancer with large sample for clinical data analysis. As a result, we expect our study will improve the study of machanism of colorectal cancer metastasis, and provide new targets for comprehensive therapy.

细胞骨架系统与肿瘤浸润有密切关系，肿瘤细胞浸润转移过程中某些细胞骨架成分(F-actin、Tubulin)改变可增加癌细胞运动能力。CCT是近年来发现的重要伴侣蛋白，能调节细胞新生骨架蛋白的折叠。前期实验我们证实了CCTζ亚基在结直肠癌中高表达，并能显著影响肿瘤细胞的生长、运动能力和骨架系统的变化，但机制不清。研究证明PhLP3、PFDN是能与CCT结合的重要蛋白，并能调节CCT对底物- - 新生Actin、Tubulin的折叠，而PhLP3和PFDN则在结直肠肿瘤中异常表达。在此项研究中，我们拟通过体外实验和动物体内实验探讨PhLP3、PFD与CCT的相互作用，并调节骨架蛋白的折叠；观察PHLP3、PFD表达变化后对肿瘤细胞骨架系统形态及功能的影响，进一步检测PhLP3和PFDN在结直肠癌中的表达，结合临床病理资料分析预后。以探讨结直肠肿瘤转移的可能机制，为综合治疗提供新靶点和新思路。

有研究表明，CCT是真核细胞胞质中的分子伴侣，由8个亚基组成 (α, β, γ, δ, ε, ζ, η, θ)，辅助细胞内近20%蛋白的正确折叠，主要包括细胞骨架蛋白actin、tublin，细胞周期调节蛋白PLK1等。干扰某些CCT 亚基表达时，会造成某些底物表达受限，进而出现细胞形态改变和功能障碍，如细胞周期异常和细胞增殖受限等。CCT许多亚基在肿瘤组织中高表达，且表达程度与肿瘤分期和患者生存率具有相关性。我们在前期实验中证实了PLK1和CCTζ亚基在结直肠癌中表达增高，并与肿瘤浸润深度及肿瘤大小正相关。有基础研究文献表明胞浆 PhLP和PFDN蛋白复合体能将蛋白底物转运至 CCT 并与 CCT 相结合，从而参与 CCT 对底物蛋白质的正确折叠。PhLP3(又名TXNDC9或APACD)，构成PhLP蛋白复合体的第三个亚基，能通过与CCT, actin或tubulin形成三聚体阻断细胞骨架蛋白的合成，其尾部结合的TXNDC9结构域作为胞浆内的电子传递体，对维持细胞内的氧化还原状态有重要作用。而与 CCT 相结合的另一种蛋白 PFDN 则能帮助新生骨架蛋白的正确折叠。国内关于伴侣素TXDNC9和PFDN1的研究尚未见其他报道，在肿瘤发生发展过程中的功能更不得而知。我们拟通过体外实验和动物体内实验探究PhLP3、PFDN1在结直肠癌发生发展中的作用，与CCT的相互作用，并调节骨架蛋白的折叠；观察PHLP3、PFDN1表达变化后对肿瘤细胞骨架系统形态及功能的影响，结合病理资料进一步检测PhLP3和PFDN1在结直肠癌中的表达。.本研究中，我们发现相比于正常组织，TXNDC9和PFDN1在结直肠癌中表达明显升高，并且与肿瘤大小、分期密切相关。并参与肿瘤细胞的增殖、迁移和侵袭、细胞周期等生命活动和细胞骨架蛋白的合成。该研究探究了TXNDC9、PFDN1在结直肠癌发生发展中的重要作用，能通过影响细胞骨架蛋白的合成影响肿瘤细胞的生命活动。该研究发掘并证实TXNDC9和PFDN1可作为潜在的肿瘤标志物，在细胞骨架参与的肿瘤生长、侵袭和转移过程补充了新的理论支持。