c-Myb调控胚胎干细胞造血分化/肿瘤转化的机制研究

研究表明干细胞具有正常分化及肿瘤转化的双重作用。然而是什么物质、怎样决定其走向并不清楚。目前发现转录因子c-Myb与ES细胞造血分化相关，而c-myb基因的突变体v-myb（即一个末端被截断和点突变衍生的c-myb基因）可以引起鸡的急性髓细胞白血病。提示c-Myb可能具有分化及肿瘤转化的双重作用。它是怎样调节两个截然相反的生物学过程尚不清楚。本课题拟采用c-myb+/- ES细胞作为靶细胞，利用基因打靶技术，将v-myb插入c-myb基因座，建立c-mybloxp/v-myb ES细胞系，通过对c-myb+/-与c-mybloxp/v-mybES细胞进行体外诱导分化与转化生物学特性及其相关基因的比较研究，探讨亚表达水平的c-Myb及v-myb对造血分化与转化的影响。籍以阐明c-Myb在ES细胞造血分化和肿瘤转化中的双重作用及其机制。这对于揭示干细胞分化与转化的实质意义重大。

本课题通过胚胎干细胞（ESC）体外诱导分化的研究体系，探索c-myb参与定向造血分化的机制；通过巨噬细胞分化体系研究v-myb在ESC肿瘤细胞转化中的角色。 前期摸索了诱导分化分化的条件；构建了靶向c-myb的慢病毒并摸索感染ESC。但是由于ESC转染反复尝试均失败，并且ESC体外造血分化诱导难度大、时间长，且在我们的实验在进行的过程中，检索到了与我们思路和推测机制类似的多篇论文，因此，转而采用白血病的模型来研究c-myb参与造血分化调控和细胞恶性转化的机制。在标本中检测到c-myb在白血病中高表达，诱导分化U937和THP-1细胞向巨噬细胞分化后c-myb的表达明显下调。为了探索c-myb表达变化的发生机制和下游生物学效应，我们锁定具有造血调控作用的去类泛素化修饰蛋白酶1(sentrin-specific proteinase 1, SENP1）,发现该分子在白血病标本中高表达，且在诱导分化U937和THP-1细胞向巨噬细胞分化后表达明显下调。我们发现SENP1作为蛋白酶，可能影响c-myb上游转录因子的活性继而影响c-myb的表达; 反过来，发现c-myb作为转录因子可能通过调节该基因的启动子活性而影响SENP1的表达。本研究目前发表相关SCI论文3篇。