利用猪圆环病毒-2研制新型基因疫苗载体

①本实验先构建高效表达PCV-2结构蛋白Cap基因的PK-15细胞（PK-15Cap）；②用重组PCR方法敲除PCV-2基因组的结构蛋白Cap编码区，而代之以报告基因EGFP，然后，以酶切连接的方法获得环化的Cap编码区被取代的PCV-2"基因组"；③将改造后的PCV-2"基因组"转染PK-15Cap细胞，获得含EGFP基因的PCV-2假病毒粒子。然后，以此为基础，研究PCV-2的最大包装能力及该假病毒的遗传稳定性。最后，用类似的方法获得含猪瘟病毒（CSFV）E2基因或其主要的保护性抗原编码区的PCV-2的假病毒，并免疫接种PCV-2抗体阴性猪，观察其抗CSFV的免疫反应。该PCV-2假病毒可作为一种新型基因疫苗载体，它不但可将目的基因高效地转运进入细胞核，且所转运的目的基因在细胞内还能复制，从而显著增强免疫应答。该系统的另一特点是可诱导动物机体产生粘膜免疫应答反应。