Rho鸟苷酸解离抑制因子-2调控beta-2肾上腺素能受体减敏机制的研究

β2肾上腺素能受体（β2AR）减敏是临床非常常见的问题，我们在前期研究的基础上发现Rho鸟苷酸解离抑制因子－2 (RhoGDI2)在β2肾上腺素能受体减敏调节过程中起着非常重要的作用，结合新近国内、外的相关文献，我们推测其可能通过调节GEF/GAP（鸟苷酸交换因子/GTP酶活化蛋白）比值, 影响GRK2活性，从而调控β2AR减敏，可能在β2AR减敏的早期起作用。为了验证这一科学假说，我们分别从细胞水平和整体水平通过SiRNA技术和腺病毒载体的过表达技术全面研究这一通路的详细作用机制并检测GRK2酶活性的改变，提出β2AR减敏的一个可能新思路。在此基础上，通过GRK2酶活性的动态变化探讨这一β2AR减敏通路和传统的β2AR减敏胞内信号通路之间的关系，为进一步的研究打下坚实的基础。同时给临床防治β2AR减敏提供了第一手的实验资料和理论指导，具有非常重要的临床实用价值。

通过前期蛋白组学研究发现RhoGDI2在beta-2肾上腺素能减敏过程中可能起着重要的作用，故本研究分别构建细胞水平和动物水平beta-2肾上腺素能减敏的细胞模型和动物模型，通过RNAi技术，分别构建了RhoGDI2过表达和沉默的慢病毒载体，以细胞模型和动物模型为载体，分别从蛋白水平和核酸水平检测了经过过表达及沉默以后各节点信号蛋白表达及其核酸水平的表达（RhoGDI2，GEF，GAP，GRK2和β2AR），并进一步通过PKC活性的变化试图从功能学角度讨论节点蛋白的变化与beta-2肾上腺素能减敏之间的关系，验证了我们的科学假说：RhoGDI2作用于GEF/GAP, 后两者比值的变化引起小G 蛋白活性的改变，影响GRK2 从而调节β2AR 减敏。实验总体过程顺利，达到了预期的结果，完成了整个实验。目前已取得部分成果，有些后续性成果待进一步整理、发表。