青海悬钩子属植物保护胰岛β细胞活性成分及作用机制研究

There is a rich variety of Rubus plant resources in Qinghai. Rubus has the powerful active substances, but it is still lack of effective protection and utilization. By the HPLC fingerprint, the main component analysis and cluster analysis method, the identification and assessment of Qinghai Rubus resources were discussed in this project on the basis of our previous studies from the chemical composition perspective；Islet beta cell membrane chromatography is used to confirm the active ingredients of Rubus in the prevention and treatment of diabetes; Solvent extraction method and several modern chromatographic techniques were used to isolate the chemical constituents of Rubus, and the structure of chemical constituents were identified according to physicochemical properties and spectralanalysis(EI, ESI, 1H-NMR, 13C-NMR, DEPT and 1H-1HCOSY, HSQC, HMBC, 2D-NMR, etc.);To clarify the protect mechanism of Rubus on the islet beta cells and provid basis for the Protection and utilization of Qinghai Rubus plant resources.

青海地区悬钩子属植物资源丰富，活性成分药效显著,迄今仍然缺乏有效的保护和利用。本项目拟在前期研究的基础上，从青海悬钩子属植物化学成分的角度出发，在明确青海悬钩子属植物资源品种的基础上，采用HPLC指纹图谱、主成分分析、聚类分析等方法对悬钩子资源进行质量评估；采用胰岛β-细胞膜固相色谱法确认其防治糖尿病的活性成分；采用溶剂萃取法、CO2超临界流体萃取及多种现代色谱技术，对青海悬钩子进行化学分离；利用理化鉴别及现代波谱分析技术（EI、ESI、1H-NMR、13C-NMR、DEPT以及1H-1HCOSY、HSQC、HMBC、2D-NMR等）鉴定化合物的结构；阐明悬钩子保护胰岛β细胞的作用机制，解决青海悬钩子属植物资源保护和利用的关键科学问题。

项目背景: 悬钩子属植物在传统医药学中应用广泛、药效显著，其活性成分及作用机制有待明确；各地区应用悬钩子品种不一，有必要明确其资源品种、选定与药理活性密切相关的成分加以质量评估研究，以指导实践；同时，青海悬钩子属植物化学成分如何？也是悬钩子应用需解决的重要问题；作为国际公认的食药用植物资源，悬钩子属植物发挥药理作用的活性成分是什么？作用机制如何？对这一问题开展研究，有助于悬钩子在促进生命健康方面发挥更好作用。.主要研究内容： 对青海悬钩子属植物资源进行确切的品种鉴定和质量评估、提取、分离与结构鉴定；确认悬钩子保护胰岛β细胞的活性成分，明确悬钩子保护胰岛β细胞活性成分的作用机制。.重要结果及关键数据：本研究对青海悬钩子属植物资源进行了确切的品种鉴定，明确了青海悬钩子 的主要品种；研究选取与悬钩子属植物众多药理活性紧密相关的总酚为指标，在确立福林酚试剂法和紫外分光光度测定方法的基础上，构建了悬钩子属植物总酚检测质量评估方法；研究提取分离并鉴定了15个化合物的结构，明确了青海悬钩子属植物的化学成分；研究采用胰岛β细胞膜固相色谱法筛选悬钩子中活性成分与胰岛βMIN6细胞结合的活性成分，明确原花青素B为主要活性成分；研究采用小鼠胰岛β Min 6细胞研究悬钩子原花青素(PCs)的作用机制，证明了PCs对胰岛细胞的保护作用与通过激活Akt/FoxO1信号通路抑制MIN6细胞凋亡有关。.科学意义： 本研究构建的悬钩子总酚检测质量评估方法、细胞膜固相色谱法筛选悬钩子保护胰岛β细胞活性成分的方法，提供了基础数据和科学方法，对于青海悬钩子属植物资源的保护和利用具有理论价值和应用潜力，又为筛选其他具有潜在保护胰岛β细胞活性成分药用价值的植物资源提供了科学借鉴，本研