胃癌化疗多药耐药中RhoGDI2上调Mdr-1的机制研究

胃癌化疗多药耐药是一直以来困扰临床医生的重要问题。为了寻找化疗反应相关基因以帮助解除化疗耐药，我们前期通过蛋白质组学技术比较5-FU耐药与敏感细胞株之间的差异蛋白，筛选并鉴定出的RhoGDI2蛋白，在耐药株中调低后可一定程度逆转耐药表型。进一步研究显示，RhoGDI2在胃癌组织中高表达，且胃癌细胞株中RhoGDI2表达水平与5-FU的耐药性成正相关，胃癌细胞中过表达RhoGDI2诱发多药耐药。我们还发现过表达RhoGDI2能诱导多药耐药基因-1（Mdr-1）蛋白水平升高。而文献报道RhoGDI2主要直接调节Rac1 GTPase的活性。因此，我们推测在胃癌中，RhoGDI2通过调节Rac1 GTPase，上调Mdr-1水平，引起药物外排，诱发多药耐药。本课题将通过实验验证这一假设，并从蛋白合成与蛋白降解两方面入手，深入探讨RhoGDI2上调Mdr-1水平的机制。

化疗多药耐药是一直以来困扰肿瘤科医生的重要问题。RhoGDI2是前期我们通过蛋白质组学技术筛查发现的可能参与化疗耐药的基因。本项目研究了RhoGDI2参与调节多药耐药基因-1（Mdr-1）表达和 多药耐药机制做了研究。结果发现（1）RhoGDI2在胃癌中高表达，且与P-gp蛋白表达具有相关性。（2）RhoGDI2在胃癌细胞中诱发多药耐药，并上调P-gp表达和活性，且主要通过上调mRNA表达。（3）RhoGDI2在胃癌细胞中上调Rac-1活性，采用siRNA干扰Rac-1表达后，RhoGDI2上调Pgp的作用消失。（4）在其他癌症中如卵巢癌，RhoGDI2的作用有所不同，干扰RhoGDI2表达使得细胞对紫杉醇、顺铂等的敏感性改变不明显。（5）RhoGDI2在胃癌细胞胞中抑制5-fu诱发细胞周期在M2期的积聚。通过本项目研究基本明确了RhoGDI2通过Rac1上调P-gp参与胃癌多药耐药，但是有可能同时存在其他诱发多药耐药的机制，并且这种效应是在不同类型环境中（如不同来源细胞）有所不同。