肝细胞癌骨转移的分子预测模型研究

肝细胞癌(HCC)骨转移严重影响患者的生存期和生活质量，约占HCC肝外转移的38.5%。建立HCC骨转移的分子预测模型预测骨转移，可使高危患者及时接受预防性治疗从而降低骨转移发生率。我们前期研究发现CXCR4与HCC骨转移相关，但HCC骨转移受多因子调控。我们拟取有和无骨转移2组HCC患者癌及癌旁组织蜡块，提取总RNA后用cDNA介导退火、选择、延伸、连接反应（DASL芯片技术）筛选骨转移相关基因，从中找出为独立预后因素的基因初步建立分子预测模型。ROC曲线验证预测模型，RT-PCR验证侯选基因。组织芯片、免疫组化检测侯选基因蛋白表达。另外随机抽取HCC术后患者石蜡标本，QPCR检测分子预测模型候选基因，双盲验证分子预测模型。RNAi 敲除HCCLM3细胞株候选基因，MTT、细胞划痕、Matrigel侵袭等实验进一步验证分子预测模型所含基因的功能。最终建立HCC骨转移分子预测模型。

目的：肝细胞肝癌（HCC）骨转移严重影响患者的生存期和生活质量，本研究拟建立HCC骨转移的分子预测模型预测骨转移，并研究HCC骨转移可能的分子及细胞机制。.方法：通过提取48对HCC患者肿瘤内和肿瘤旁石蜡包埋组织中的RNA，采用DASL基因芯片检测骨转移相关基因，并建立组织芯片对候选基因表达的蛋白进行验证。建立基因敲除及体外细胞缺氧模型进一步体外观察候选基因的功能。.结果：7个肿瘤内及17个肿瘤旁高表达基因与HCC骨转移相关。我们选取结缔组织生长因子（CTGF）及白介素11（IL-11）进一步研究，基因敲除CTGF及IL-11可降低HCC细胞的侵袭与迁移。体外缺氧可刺激CTGF以及MMP-2，MMP-9高表达。建立了由CTGF、IL-11、CXCR4、血管侵犯和TNM分期组成的预测模型，利用此模型预测HCC骨转移的灵敏度和特异度分别为73.7%和78.7%。.结论：肿瘤内CTGF和IL-11表达是HCC骨转移的独立预后因素，联合应用肿瘤内CTGF、IL-11以及CXCR4表达，血管侵袭和TNM分期可有效预测HCC骨转移。肿瘤缺氧提高了CTGF表达引起了一系列的级联反应在HCC骨转移中可能发挥重要作用。最终建立了HCC骨转移的分子预测模型。