purR调节蛋白的结构和功能关系的遗传学研究

PurR为全局调控蛋白，在细胞生命活动中起关键作用。本基金对该蛋白进行了结构与功能关系的遗传研究。采用purR（s）超阻遏突变体快捷地分离到439株独立的purR（-）突变体，从中检测到11株purR（am）突变体，对其中6株作了am突变位点测定，表明每一突变体的purR均存在1个终止密码TAG的突变，且都发生在PurRCBD功能区。其中3个突变发生在C（933）→T，2个在G（721）→A，1个在C（1155）→T，分别相当于PurR蛋白Gln218，Trp147和Gln292位置。采用转导和质粒转化方法，分别向3个am位点引入7种不同的tRNA抑制基因，实现了Cys等7种氨基酸在这3个位点的氨基酸取代，创造了21种新的PurR蛋白变体，对变体的调节功能分析，首次揭示Gln292为PurR蛋白的一个不可取代的氨基酸。