存活和死亡克隆牛X染色体表观遗传修饰及基因表达差异研究

哺乳动物X染色体是表观遗传学研究的良好模式材料，动物克隆异常也是表观修饰异常造成的。本实验以存活和死亡克隆牛的X染色体作为研究对象，拟回答两个问题：1、离X染色体失活中心（Xic）较近的基因一般表现出沉默，而较远的基因一般表现出逃逸，克隆动物X染色体基因表达将表现出何种规律或差异？2、由于失活X染色体与基因组印记有许多相似之处，在基因组印记中心的基因表达主要受DNA甲基化调控，而远离印记中心的基因则主要受组蛋白修饰控制，那么X染色体基因表达是如何控制的呢？为此，本实验利用找到的X染色体分子标记（表达SNPs）和real－time PCR技术，检测不同克隆牛X染色体10个等位基因表达情况；利用DNA甲基化、免疫荧光技术、免疫沉淀（ChIP）－QPCR技术从整体和单个基因的角度研究克隆牛X染色体DNA甲基化和组蛋白表观修饰变化特征，这些结果都将成为研究动物克隆机理极为有价值的探索性地研究成果。