SNARE蛋白介导突触前神经元谷氨酸的释放在针刺抗抑郁中的作用机制

Glutamic acid (Glu) and the pathological physiology of depression are closely related, the SNARE proteins can mediate the release of Glu in presynaptic neuron. V-GLUT protein and the key components of SNARE proteins（VAMP、SNAP-25、syntaxin）play an important role in the process. In view of the safety and effective of acupuncture antidepressant, the research applicates lateral ventricle injection, magnetic resonance,western blot, RT-PCR and other molecular biology technology and investigates Glu content of the depression rats and VAMP7 gene knockout mice in the hippocampal before and after acupuncture, distribution of Glu in presynaptic neurons and synaptic gap, gene expression and protein content of V-GLUT and SNARE proteins. Discuss the antidepressant mechanism of acupuncture based on SNARE proteins modulating the release of glutamic acid in presynaptic neurons and reveal the important way and target of acupuncture antidepressant. The study is in a new field of acupuncture antidepressant mechanism which different from the traditional thinking of previous studies that focused on the signal transduction pathways and can provide a useful reference for the clinical guidance.

谷氨酸递质（Glu）与抑郁症的病理生理有密切的关系，SNARE蛋白可介导突触前神经元Glu的释放，V-GLUT蛋白及SNARE的关键组分（VAMP、SNAP-25、syntaxin）在此过程中发挥重要作用。本研究在针刺抗抑郁安全、有效的基础上，应用侧脑室注射、磁共振以及western blot、RT-PCR等分子生物学前沿技术，考察抑郁症大鼠和VAMP7基因敲除小鼠在针刺前后的海马Glu含量、突触前神经元及突触缝隙Glu分布、V-GLUT及SNARE蛋白的基因表达和蛋白含量。探讨SNARE蛋白介导突触前神经元Glu的释放在针刺抗抑郁中的作用机制，揭示针刺抗抑郁的重要途径和靶点。该研究有别于以往研究大多局限在信号转导通路这一传统思路，是针刺抗抑郁机理研究的新领域，可为指导临床提供有益参考。

谷氨酸递质（Glu）与抑郁症的病理生理有密切的关系，SNARE蛋白可介导突触前神经元Glu的释放，V-GLUT蛋白及SNARE的关键组分（VAMP、SNAP-25、syntaxin）在此过程中发挥重要作用。本研究采用长期不可预见性温和刺激的方法，构建抑郁症大鼠模型。应用侧脑室注射肉毒素A，考察抑郁症大鼠在针刺前后的行为学变化、海马Glu含量、突触前神经元及突触缝隙Glu分布、V-GLUT及SNARE蛋白的基因表达和蛋白含量。经过21天不可预测的温和性刺激，大鼠表现出抑郁症的行为学改变，包括运动量、体重和蔗糖消耗量均显著下降。当抑郁症大鼠给与侧脑室注射肉毒素A后，再进行利鲁唑或针刺治疗，大鼠的运动量、体重和蔗糖消耗量均与模型组大鼠相似，抗抑郁药物利鲁唑和针刺对抑郁症大鼠均无治疗效果。高效液相色谱法测定海马组织中谷氨酸含量，与模型组大鼠相比，注射肉毒素A后，再进行针刺和药物干预其谷氨酸含量变化不明显。针刺和利鲁唑均能使V-GLUT蛋白表达升高， SNARE蛋白及其关键组分蛋白表达降低；肉毒素A+利鲁唑组和肉毒素A+针刺组大鼠的SNAP-25、VMAP1、VMAP2、VMAP7和syntaxin1表达量接近于模型组大鼠，利鲁唑和针刺组对上述蛋白表达量无明显影响。综上所述，针刺可以提高抑郁症大鼠的活动量、体重和蔗糖消耗量；使抑郁症大鼠的神经元数目增加，核内空泡数量减少，改善神经元细胞连接松散的状态；降低海马谷氨酸含量；降低V-GLUT蛋白，SNARE蛋白及其关键组分的表达水平，从而改善了抑郁症大鼠的抑郁状态。当给与模型组大鼠侧脑室注射SNARE的特异性蛋白水解酶（肉毒素A）后，针刺和抗抑郁药利鲁唑对大鼠的活动量、体重和蔗糖消耗量、神经元数量和形态，海马谷氨酸含量均无明显影响。以上研究结果表明，针刺通过调节SNARE蛋白及其关键组分的表达水平，调控海马谷氨酸的含量，从而达到抗抑郁的作用；本研究结论为针刺抗抑郁的潜在机制研究提供了一个新靶点，可为指导临床提供有益参考。