L型钙离子通道羧基末端在牙髓干细胞多向分化中的作用研究

L型钙离子通道广泛存在于机体各种细胞，Cav1.2是其在牙髓细胞中的主要亚型。在生理条件下，Cav1.2 的a1亚基羧基末端可以被蛋白酶水解而形成游离的生物活性片段，并藉此行使细胞内钙离子流的调节和多种基因的转录调控作用。L型钙离子通道在神经细胞的分化和组织发育中发挥着重要作用，但在牙髓干细胞分化中的作用和机理尚不清楚。本项目在前期研究的基础上，拟采用干细胞原代培养、流式筛选、蛋白分析、质粒转染、RNA干扰等技术，研究L型钙离子通道羧基末端在牙髓干细胞多向分化中的作用及调控机理，为牙髓干细胞在再生医学中的广泛应用提供有价值的实验依据。

本项目经过系统的研究，首次明确了在大鼠牙髓干细胞中有L型钙离子通道Cav1.2及其羧基末端的表达，并通过免疫荧光染色，实时定量PCR，Western Blot等技术证实了Cav1.2 羧基末端在大鼠牙髓干细胞向成牙本质细胞，成神经细胞，成软骨细胞方向分化过程中起至关重要的作用。应用L型钙离子通道特异性阻断剂和Cav1.2-shRNA干扰可以抑制其向成牙本质细胞，成软骨细胞和神经细胞方向分化，且rDPSCs向成牙本质细胞和成软骨细胞分化后Cav1.2 的DCT明显下降，推测与成牙本质细胞的成熟以及DCT的负反馈调节机制相关，而向成神经分化后DCT表达明显增高可能与在神经细胞中发挥重要的基因调控作用有关。这些研究结果为牙髓损伤修复中牙髓干细胞的研究，以及牙髓干细胞在组织工程中的应用提供了重要的实验依据。在本项目的支持下，已发表期刊论文9篇，其中包括4篇SCI论文，国内核心期刊2篇，国内一般期刊3篇；国内会议报告3篇。