系统性硬化症外周血及肺脏microRNA表达谱及功能研究

系统性硬化症（SSc）是一种重要的自身免疫病，易合并肺部病变，早期诊治困难，致残、致死率高，亟需提高诊断水平并探索新的治疗靶点。小分子RNA（miRNAs）调控异常可引起多种自身免疫病，其表达谱和功能研究已成为揭示细胞内分子调控机制的有力工具。本课题利用前期系统性红斑狼疮miRNAs表达谱的研究平台，高通量筛选SSc外周血单个核细胞和血浆中异常的miRNAs表达谱；通过大样本临床与标本库进一步筛选与肺部病变相关的调控促纤维化因子表达的miRNAs，并在前期已建立的博来霉素诱导的SSc小鼠模型肺组织中进行验证；利用小鼠模型肺微血管内皮细胞进行miRNAs对靶基因的功能研究和验证；采用前期发现的对SSc肺部病变较特异的抗膜突蛋白抗体处理血管内皮细胞，探索其在miRNA水平的致纤维化机制，试图在miRNAs水平将自身免疫、内皮细胞损伤和纤维化三方面机制联系起来，进一步揭示SSc的发病机制。

系统性硬化症（SSc）是一种重要的自身免疫病，易合并肺部病变，早期诊治困难，致残、致死率高，亟寻找新的生物标志物以提高诊断水平并探索新的治疗靶点。本课题首先应用高通量miRNA表达谱芯片技术进行筛选SSc外周血中特异的miRNAs，再通过real-time PCR实验在大样本临床与标本库中进一步验证血浆及外周血单个核细胞（PBMC）中的miRNAs（has-miR-29b、has-miR-320a/b/c，has-miR-423-5p与has-miR-125b）与不同SSc临床表型（指端溃疡、毛细血管扩张、肺间质病变及肺动脉高压等）的相关性，为临床评估SSc的多系统病变提供了新的miRNAs标记物。然后在已建立的博来霉素诱导的SSc小鼠模型肺组织中验证以上miRNAs的差异表达，并同时采用mRNA表达谱芯片和生物信息学分析推测了可能受目标miRNAs调控的靶基因（Cxcl9、Cxcl10、Igf1、Fcgr2b、Cd109、Foxp3）。此外，本课题另外应用蛋白质芯片初步研究了SSc患者血清蛋白表达谱，分别发现了SSc伴肺动脉高压及肺间质病变患者血清中表达上调的蛋白质（分别是IL-17D、RYK、IL-13 Ralpha 1，CD97，Fyn与NET1，Netrin G2，Galanin）。同时，本课题还探索了SSc不同临床表型间的相关性，为临床早期诊断提供指导。