清金化痰汤对AECOPD痰热郁肺型大鼠气道上皮细胞自噬作用机制的研究

AECOPD is a disease of systemic dysfunction, its pathogenesis remains unclear, "phlegm" and "hot" thermal yu lung phlegm is the main type of syndrome, chronic airway inflammation is the main pathological characteristics, and airway epithelial cell damage is an important pathological basis of AECOPD ，qing jin hua tang decoction has the function that clear out phlegm, heat phlegm heat , so the project by extraction and cultivate AECOPD rat airway epithelial cells as the breakthrough point, Drug serum that is made by qing jin hua ting decoction intervent airway epithelial cells and by modern molecular biology techniques to detect airway epithelial cells release of inflammatory cytokines and inflammatory medium, and airway epithelial cells of autophagy and its repair, reveal the relationship between the three, so as to explore the pathogenesis of AECOPD and clear phlegm gold particles intervention effect ,for the theory of combining traditional Chinese and western medicine treatment of COPD with experimental data.

AECOPD是一种造成全身功能障碍的疾病，其发病机制仍不明确，“痰”、“热”为主的痰热郁肺型是其主要中医证型，慢性气道炎症是其主要的病理特征，而气道上皮细胞受损是AECOPD重要的病理基础，清金化痰汤具有抗痰、热为主的痰热郁肺型的作用，因此本项目通过提取及培养AECOPD大鼠气道上皮细胞为切入点，采用清金化痰汤药物血清干预气道上皮细胞，通过现代分子生物学技术检测气道上皮细胞释放的炎症因子及炎症介质、气道上皮细胞自噬及自身的修复情况，揭示三者之间的关系，从而探讨AECOPD的发病机制及清金化痰汤的干预作用，为中西医结合治疗COPD提供实验数据理论。

AECOPD是一种造成全身功能障碍的疾病，其发病机制仍不明确，“痰”、“热”为主的痰热郁肺型是其主要中医证型，慢性气道炎症是其主要的病理特征，而气道上皮细胞受损是AECOPD重要的病理基础，清金化痰汤具有抗痰、热为主的痰热郁肺型的作用，我们通过提取及培养AECOPD大鼠气道上皮细胞为切入点，采用清金化痰汤药物血清干预气道上皮细胞，通过现代分子生物学技术检测气道上皮细胞释放的炎症因子及炎症介质、气道上皮细胞自噬及自身的修复情况，揭示三者之间的关系，从而探讨AECOPD的发病机制及清金化痰汤的干预作用。本研究的实验结果显示：（1）在进行对大鼠熏烟处理造模后，AECOPD（痰热郁肺型）大鼠的气道炎症细胞活力具有明显降低。各组细胞凋亡率与模型组对比均降低。模型组在GFP-LC3转染后经荧光显微镜检测细胞内自噬体数量明显高于正常组。而在清金化痰汤干预后气道上皮细胞的自噬体数量能明显降低。（2）清金化痰汤可明显减轻AECOPD大鼠气道上皮细胞炎症反应,对气道上皮起到保护作用。其作用机制可能是通过对气道上皮细胞自噬蛋白（Beclin-1、LC3-I、LC3-II及LC3-II/I蛋白表达）的调节,抑制炎症因子IL-6、IL-8的水平,从而达到减轻炎症反应,发挥抗炎作用达到抑制COPD的急性发作与加重。（3）清金化痰汤浓度越高对降低炎症因子的效果越好，并且降低 气道炎症反应机制可能与调节自噬有关。其主要是通过调节自噬蛋白P62抑制气道中的 IL-1β、TNF-α、LTB4以及LTC4等炎症因子的释放，从而达到抗炎效果。本研究通过从系统生物学水平，采用分子生物学技术，发现气道上皮细胞自噬对炎症因子变化的影响，阐明中药的物质基础和作用机制。为从系统、整体水平解释阐明中医药 QJHTD 治疗AECOPD的科学内涵，揭示清金化痰汤对 AECOPD 的分子机制，一定程度上为中西医结合治疗 AECOPD 的作用机制和研究思路提供实验依据。