家蝇Toll受体模式及其对抗微生物肽表达调控的机理研究

昆虫抗微生物肽是体内一种具有广谱抗菌作用的小分子多肽，其表达受Toll/NF-кB信号途径的调控。本项目拟以中国家蝇为实验材料，运用同源克隆策略和RACE技术克隆家蝇体内的Toll家族成员，运用RNAi抑制Toll家族基因的表达，阻断或减弱家蝇抗微生物肽产生的信号传导，使家蝇更易感染病菌而死亡，以期为通过调控害虫免疫系统的开启来控制害虫奠定基础；运用定量RT-PCR、Northern印迹、原位杂交等方法检测Toll家族基因表达的组织特异性和Toll阻断前后抗微生物肽基因的表达谱，阐明Toll家族在家蝇抗微生物肽信号传导中的功能；采用抑制消减杂交（SSH）筛选免疫的健康家蝇虫体和RNAi抑制家蝇虫体的抗微生物肽cDNA序列，以期获得家蝇体内新的抗微生物肽基因。该项目运用了靶标特异性强的RNAi技术，避免了环境污染，为家蝇的综合防治提供了一种新的手段，并为新的抗微生物肽基因的筛选开辟新的思路。