基于二维液相色谱的中药注射液质量控制方法研究及应用

Traditional Chinese medicine injection was developed base on the new dosage form of traditional Chinese medicine, the advantages of traditional Chinese medicine injection was efficacy and effectiveness. Quality control of traditional Chinese medicine injection has become an issue that needed to be addressed as a matter of urgency owing to the complexity and diversity of chemical components of traditional Chinese medicine injection. In this study, we intend to establish an two dimensional liquid chromatography analytical method used to determine the content of effective components and impurity limit content of the allergic components in traditional Chinese medicine injection. Firstly, cell membrane chromatography online high performance liquid chromatography tandem mass spectrometry was used to recognize, analyze and identify the effective components and allergic components in traditional Chinese medicine injection. And pharmacological experiments and animal experiments were used to verify the effective components and allergic components in traditional Chinese medicine injection screened above. And then to establish a strong specificity, high sensitivity, good accuracy of two dimensional liquid chromatography method used for the quality control of traditional Chinese medicine injection. This method was used to determine the content of effective components and impurity limit content of the allergic components in traditional Chinese medicine injection at the same time, to ensure that the traditional Chinese medicine injection is safe and effective. To establish a new method to determine the allergic and effective components from traditional Chinese medicine injection in this study, guarantee the quality of traditional Chinese medicine injection from the view of safe and effective. This study can provide new ideas for the development of traditional Chinese medicine injection industry, and protect the new dosage form of traditional Chinese medicine and to push the new process of traditional Chinese medicine modernization.

中药注射液是在中药制剂基础上发展起来的新剂型，具有疗效好、起效快等优点。用于治疗心脑血管疾病的中药注射液临床应用广泛，但由于中药物质基础的多样性与复杂性，临床易发过敏等不良反应，因此质量控制成了中药注射剂亟需解决的科学问题。本研究拟建立基于二维液相色谱的中药注射液质量控制方法体系并进行相关应用。首先采用细胞膜色谱与液质的二维联用方法，进行中药注射液有效组分和致敏组分的识别-分析-鉴定研究，并利用体外药理实验及动物实验，验证中药注射液的有效组分和致敏组分。然后建立专属性强、灵敏度高、准确性好的基于二维液相色谱的中药注射液有效组分和致敏组分的分析方法，用于同时对中药注射液中有效组分进行含量测定、致敏组分进行杂质限量，保证中药注射液的安全有效。本研究建立中药注射液质量控制新方法，从有效和安全的双重角度保障中药注射液的质量，为中药注射液质量控制的行业发展提供新思路，为中药这一新剂型保驾护航。

由于中药物质基础的复杂性和多样性，中药注射液引起的过敏反应已引起国内学者的高度重视，并提出了相应的中药注射液生物检定和生物评价的模型和方法，但是由于分析方法不具有普遍性，尚不能保证中药注射液的安全。亟需更加灵敏、快速的中药注射液分析方法，保证中药注射液的有效和安全。本研究选择临床应用量大用于治疗心脑血管疾病的中药注射液为研究对象，以二维液相色谱为研究手段，建立了类过敏组分在线识别-分析-鉴定系统对中药注射液中的潜在致敏组分进行筛选，并进行相应的体内外药理验证；同时建立了有效组分在线识别-分析-鉴定系统对中药注射液的有效组分进行筛选，并进行相应的体内外药理验证；最后，建立中药注射液质量控制的2D-LC分析方法，同时对识别出的致敏组分和有效组分进行含量测定，既实现对中药注射液中有效组分的含量测定，又对中药注射液中的致敏组分进行限量，形成中药注射液质量控制新的方法体系，为中药这一现代化剂型保驾护航。本课题实施过程中建立了中药注射液中类过敏组分识别的模型并用于丹红注射液致敏组分的筛选，发现异丹酚酸C能够引发类过敏反应，并经过药理验证得出异丹酚酸C引发类过敏反应的最低量。建立丹红注射液中异丹酚酸C引发类过敏反应的日摄入量，拟定人当日摄入的异丹酚酸C量不宜超过23.0 μg/kg。在本项目的资助下，三年内共计发表SCI论文12篇，其中第一标准8篇，第三标注4篇；其中授权1项。项目组毕业硕士研究生2名，本科毕业设计2名，其中尚有2名博士研究生在读。项目完成后，建立5种中药注射液中类过敏物分检查法，并明确中药注射液中致敏组分的最低致敏剂量。本项目的顺利实施保证了中药注射液的有效性和安全性，从有效和安全的双重角度控制中药注射液的质量，应用二维液相色谱控制中药注射液的质量，能够显著提高分析方法的专属性、灵敏度、准确性，缩短分析时间，提高效率并降低分析成本；同时本研究思路也为其它中药注射液的质量控制提供新的思路。