胆汁酸盐转运蛋白在ω-3多不饱和脂肪酸改善肠外营养相关肝损害中的作用研究

Parenteral nutrition associated liver disease（PNALD） has been more and more recognized in clinical practice，but the mechanism is still unclear. Abnormalities of bile acids metabolism may play important roles in the pathogenesis of parenteral nutrition associated liver damage.We found parenteral omega-3 polyunsaturated fatty acids(ω-3 PUFAs) are safe and effective for treatment and prevention of PNALD in adults in our previous work, but the mechanism remains to be further investigated. Thus, we propose the hypothesis that ω-3PUFAs may modify the expression of bile acid transporters and thus to reduce and prevent parenteral nutrition related cholestasis (PNAC) induced by high density of lipid. In order to test this hypothesis, we will observe the variation of bile acid transporters at different levels, molecular, cell, tissue, individual, in mice with PNALD using Westernblot, HE staining, immunohistochemistry and other means. Our objective is to investigate abnormalities of bile acids metabolism in the pathogenesis of PNALD and therapeutic effect of ω-3 PUFAs. In this study, we will reveal the mechanism of PNALD from a new point of view, and provide new ideas for preventing and treating hepatic complications of parenteral nutrition.

尽管肠外营养相关肝损害（PNALD）在临床被越来越多的人所认知，但其发病机制并无统一认识。胆汁酸代谢异常可能是PNALD的重要发病机制之一，我们在前期工作中观察到ω-3多不饱和脂肪酸（ω-3 PUFAs）能有效逆转及预防PNALD患者肝损害。但其作用机制还有待进一步探讨。为此，我们提出假说：ω-3 PUFAs可能通过调节胆汁酸盐转运蛋白的表达，进而减轻及预防高脂质所诱导的肠外营养相关胆汁淤积（PNAC）。为了验证这一假说，我们通过静脉高脂质诱导小鼠PNALD模型，采用Western blot、HE染色、免疫组化等手段，从分子、细胞、组织及动物整体水平等多方面探讨胆汁酸盐转运蛋白与PNALD的重要关系，明确胆汁酸代谢异常在PNALD发病中的作用及ω-3 PUFAs的调控机制。本研究将从胆汁酸盐转运蛋白这个新视点为揭示PNALD的发生机制奠定基础，为肠外营养及其并发症的防治提供新的思路。

尽管肠外营养相关肝损害（PNALD）在临床被越来越多的人所认知，但其发病机制并无统一认识。胆汁酸代谢异常可能是PNALD的重要发病机制之一，我们在前期工作中观察到ω-3多不饱和脂肪酸（ω-3 PUFAs）能有效逆转及预防PNALD患者肝损害。但其作用机制还有待进一步探讨。本课题旨在首先评估ω-3 PUFAs对成人PNALD患者的治疗及预防疗效，然后观察静脉高脂质对小鼠肝脏影响以及建立小鼠PNALD模型，通过成年小鼠PNALD模型观察PNALD小鼠胆汁酸转运关键蛋白受体的改变，进而探讨FO改善PNALD小鼠肝功能的可能机制。为此，我们提出假说：ω-3 PUFAs可能通过调节胆汁酸盐转运蛋白的表达，进而减轻及预防高脂质所诱导的肠外营养相关胆汁淤积。为了验证这一假说，我们通过静脉高脂质诱导小鼠PNALD模型，采用Western blot、HE染色、免疫组化等手段，从分子、细胞、组织及动物整体水平等多方面探讨胆汁酸盐转运蛋白与PNALD的重要关系，明确胆汁酸代谢异常在PNALD发病中的作用及ω-3 PUFAs的调控机制。本研究从胆汁酸盐转运蛋白这个新视点为揭示PNALD的发生机制奠定基础，为肠外营养及其并发症的防治提供新的思路。.全课题结果可总结为：.一、ω-3 PUFAs可用于成人PNALD的预防及治疗，TPN中鱼油添加剂量0.15-0.2 g/kg安全有效；.二、脂质对肝细胞损害有剂量-时间依赖性，时间越长剂量越高，损伤越重；成年小鼠PNALD早期病理改变为肝细胞脂肪变性，并伴有胆红素升高，符合成人PNALD发病初期的临床表现；.三、在小鼠PNALD模型中，肝组织FXR、BSEP表达被抑制，并随时间延长表达逐渐减少，静脉高脂质抑制FXR及下游基因的表达表达可能是PNALD发生和发展的机制之一；.四、静脉给予ω-3 PUFAs可上调PNALD小鼠FXR及BSEP的表达，改善高脂质对胆汁酸输出蛋白的抑制作用，逆转已经升高的胆红素及肝脏脂肪变性；这也说明PNALD早期是可逆的，为临床治疗提供理论依据。