基于NF-κB通路介导的微循环障碍探讨糖尿病大鼠舌色的生物学基础研究

To establish objective evaluation methods of TCM treatment of diabetes is currently the research focus. Tongue color is an important method for TCM treatment of diabetes.We have found that tongue color objective indicators correlated with glucose metabolism in previous studies, but the mechanism is unknown. Microcirculation disorders of tongue is an important foundation tongue color formation. Inflammatory cytokines increase in diabetes,then NF-κB signaling pathway is activated with a series of effects which caused the body's microcirculation disorders. But the impact of diabetes on the tongue microcirculation is unknown.Therefore, we propose the hypothesis "Diabetes may cause tongue microcirculation disorders which influence the formation of tongue color." We use type 2 diabetic rats to test the hypotheses in the research. Firstly,we observe tongue color and tongue microcirculation features by objective indicators of tongue color, tongue and visceral microcirculation index, hemorheological indicators. Secondly,we systematic observe the pathological features of tongue by ordinary light microscopy, scanning electron microscopy, transmission electron microscopy techniques.Finally, we detect inflammatory cytokines content in tongue tissue,such as TNF-a, ICAM-1, VEGF, the expression of IKKβ, IκBα, NF-κB p50 in NF-κB pathway, and observe tongue microvascular endothelial cell apoptosis. We explore the mechanisms of tongue color in diabetic rats based on NF-κB pathway mediated microcirculation disorders, providing experimental evidence that tongue technology used in evaluate the efficacy of diabetes.

建立客观的糖尿病中医疗效评价方法是目前研究的热点与难点。舌色是糖尿病疗效评价的重要依据。前期研究发现舌色客观化指标与糖代谢存在相关性，但机制不明。舌微循环改变是舌色形成的重要基础。糖尿病时炎症因子增加，激活NF-κB信号通路引起一系列效应，导致机体微循环障碍，但糖尿病对舌微循环的影响未见研究。因此，我们提出假说“糖尿病可能引起舌微循环障碍，进而导致舌色变化”。本研究以2型糖尿病大鼠为研究对象，从三方面证实假说：通过舌色客观化指标、舌与内脏微循环指标、血流变等指标，观察舌色与舌微循环特征；通过普通光镜、扫描电镜、透射电镜等技术，系统观察舌的病理形态特征；观察舌组织TNF-a、ICAM-1、VEGF等因子含量，NF-κB通路IKKβ、IκBα、NF-κB p50等因子表达及舌微血管内皮细胞凋亡，从微循环障碍角度探讨糖尿病舌色的生物学基础，为舌诊客观化技术应用于糖尿病疗效评价，提供实验依据。

微循环障碍是糖尿病及其慢性并发症产生的重要病理生理基础，炎症因子在该过程起重要作用。舌微循环障碍是舌色形成的重要生物学基础。微循环障碍是联系糖尿病和舌色的桥梁。本研究通过舌色客观化指标、舌局部微循环指标证实，糖尿病大鼠舌色更为暗红，舌色客观化指标改变，舌局部微循环血流动力学指标降低，糖尿病大鼠舌局部存在微循环障碍；通过普通光镜、扫描电镜等技术证实，糖尿病大鼠舌组织明显的细胞裂解、坏死，伴有脂肪细胞、炎性细胞浸润, 舌毛细血管周边出现脂肪样空泡；通过观察血清、舌组织、肝组织炎症因子的变化，证实糖尿病大鼠炎症因子TNF-α、IL-1β增高；通过舌组织 mRNA水平和蛋白水平均证实，糖尿病大鼠炎症信号通路NF-κB关键因子IKKβ、IκBα、NF-κB p50 表达异常；通过血清、舌组织、肝组织趋化因子、黏附因子证实，糖尿病MCP-1、ICAM-1升高，通过血管内皮生长因子(VEGF)和血管内皮生长因子受体-2(VEGFR2)证实，糖尿病大鼠血清、舌组织、肝组织VEGF浓度升高；通过舌组织 mRNA水平和蛋白水平证实，糖尿病大鼠舌组织VEGF、VEGFR2 mRNA水平和蛋白水平表达异常。本研究初步证实，糖尿病可能引起炎症因子上升，启动炎症信号通路NF-κB关键因子IKKβ、IκBα、NF-κB p50 表达异常，趋化因子、黏附因子、血管内皮生长因子等升高，诱发舌局部微循环改变，最终出现舌色变化。 本研究基于NF-κB通路介导的微循环障碍角度探讨糖尿病舌色的生物学基础，揭示舌色与糖代谢之间的内在联系，为舌诊客观化技术应用于糖尿病疗效评价，提供实验依据和理论支持。