hALP作为结直肠癌肝转移肿瘤标志物以及作用机理研究

The human acetyltransferase-like protein (hALP) possesses acetytransferase activity and functions in cell cycle regulation. We recently found a continues decrease of expression of hALP from normal colorectal mucosa to colorectal carcinoma and the liver metastasis of colorectal carcinoma. In addition, pull down assay showed that p53 and MACC1 exist in hALP-specific immuno-complex. Ectopic expression of hALP promoted acetylation and prolonged half-life of p53 and hALP itself. Bioinformatics analysis indicated that hALP mRNA might be targeted by miR34a and miR449. In this proposal, we will investigate the expression profile of hALP and MACC1 in non-metastatic colorectal carcinoma and colorectal carcinoma with liver metastasis, aiming to explore the potential of hALP as a biomarker for the liver metastasis of colorectal carcinoma. The interactions between hALP and MACC1 in the prognosis of liver metastasis and survival of colorectal carcinoma patients will be analyzed in this proposal. The possibility of using miR34a and miR449 in the patient serum as biomarkers for liver metastasis of colorectal carcinoma will be studied. Furthermore, we'll uncover the mechanisms by which hALP stabilizes p53 and hALP. The regulation of hALP by miR34a and miR449 will be investigated as well. Finally, we'll verify the effect of hALP expression on the metastasis of colorectal carcinoma in mice model.

hALP(human acetyltransferase-like protein)有乙酰转移酶活性，在细胞周期中发挥作用。我们发现1hALP表达从正常结直肠粘膜到结直肠癌、再到结直肠癌肝转移组织中逐步下降；2hALP复合物中检测到p53和结直肠癌转移相关蛋白MACC1；3hALP使p53和自身蛋白稳定性增强；4hALP mRNA可能受到miRNA的调节。本研究将单独分析hALP以及联合分析hALP与MACC1和miRNAs与结直肠癌及其肝转移的相关性、与临床分期及患者预后的相关性，旨在探讨hALP与MACC1和相关miRNA作为结直肠癌肝转移的早期诊断和预后预测肿瘤标志物的可能性；研究hALP维持p53及hALP本身稳定性的分子机制，验证hALP特异性miRNA对hALP的调节作用，通过动物模型探讨hALP对结直肠癌肿瘤细胞生长和转移的影响，阐明hALP在结直肠癌肝转移发生中的作用机理。

hALP（NAT10）是一个核仁蛋白，近年来发现NAT10参与细胞核糖体产生、在肿瘤发生和衰老中发挥作用，本课题对NAT10在结直肠癌和肝癌中的作用和机理进行了研究。首先对NAT10的功能进行研究，发现NAT10在正常条件下通过降解MDM2发挥稳定p53在一个恒定的水平的作用，在细胞受到DNA损伤时，NAT10通过结合p53并乙酰化p53激活p53的转录活性，导致细胞周期停滞，因而抑制受到损伤的细胞增殖，同时，NAT10在结直肠癌中的表达下调；NAT10发挥激活核糖体RNA的转录需要自身在426位赖氨酸发生乙酰化；对NAT10在肝癌中的表达和临床意义进行了研究，发现NAT10在肝癌组织中表达升高，且与患者不良预后相关，研究发现NAT10在肝癌发生发展过程中主要通过加强突变的p53的活性发挥作用； NAT10与MACC1的表达没有相关性，对NAT10的另外一个结合蛋白hUTP14a在结直肠癌中的作用进行研究发现，hUTP14a结合c-Myc，并与控制c-Myc降解的FBW7和USP36形成复合物，起到稳定c-Myc蛋白促进结直肠癌进展的作用；对NAT10在肿瘤细胞代谢中的作用进行研究，发现在营养充足的条件下，NAT10激活核糖体RNA的转录，并抑制自噬；在营养缺乏的条件下，NAT10被SIRT1去乙酰化，释放对自噬的抑制，促进细胞存活；NAT10的表达下调后在小鼠致瘤的动物模型中导致肝转移，对NAT10在转移中的作用机制还在进行。构建了NAT10 基因敲除小鼠模型，正在通过小鼠模型对Nat10敲除小鼠自发肿瘤和对诱发肿瘤的敏感性进行深入研究。发现miR34a和miR449对NAT10的表达没有调节作用，研究发现miR-5580-5p和miR-6716-5p抑制NAT10的表达，正在进行深入研究。