三种猕猴桃属植物基原中药中稀有三萜类成分的差异分离、构效关系及其抗肿瘤作用机制研究

猕猴桃属植物基原中药猫人参（对萼猕猴桃或大籽猕猴桃的根）、猕猴桃根（中华猕猴桃的根）、藤梨根（软枣猕猴桃的根）系临床常用抗肿瘤中药。我们前期从三种中药中分离获得多个包括稀有结构在内的三萜类成分，部分成分具有显著的抗肿瘤活性。本课题拟在前期研究基础上，根据植物亲缘关系原理，依据指纹图谱比对、差异、定向分离思路，采用常压、MPLC、LC-MS等多种色谱手段，从中获得30～40个同母核三萜类化学成分，系统研究它们的3D-QSAR，并对经3D-QSAR预测、验证的高活性化学分子，进行细胞实验、整体动物实验研究其抗肿瘤作用，从细胞周期阻滞、诱导凋亡角度探讨其作用机制。本课题可为阐明该类中药抗肿瘤作用的物质基础奠定基础；对先导化合物筛选，候选药物的发现，具有指导作用；可促进该属植物药物用途的拓展，提高综合利用效益；鉴于三萜类成分的分布广泛性和生物活性多样性，对于该类成分的研究、利用具有牵引作用。

本课题在活性导向筛选的基础上，采用常压、中压（正相、反相）、PTLC、MPLC、HPLC等手段进行化学成分分离，采用理化方法、薄层色谱、IR、UV、MS、NMR(1H-、13C-) 以及二维谱等多种波谱技术进行结构鉴定。从猫人参中共分离获得化合物48个，鉴定了其中的33个，其中新结构化合物14个（三萜类10个）。从猕猴桃根中分离获得化合物22个，鉴定了14个；从藤梨根中获得5个，鉴定了2个。实现了对该属重点药用种类的化学研究有较好的阐明。采用MTT法对所获得三萜类化学成分进行细胞毒活性测试，结果表明多数化合物具有显著的细胞毒活性。特别是其科罗索酸对多种肿瘤细胞株均具有显著的细胞毒活性，结合之前曾进行课题研究结果综合分析，其显示出较好的开发应用前景。选择从猫人参中获得的科罗索酸，经反复测试基本确认具有显著的抗肿瘤作用，可以认定其为猫人参抗肿瘤的有效成分之一。通过细胞实验确认其可以显著上调凋亡促进蛋白，下调凋亡抑制蛋白，从而呈现出较强的诱导肿瘤细胞凋亡的作用。本课题标引课题发表SCI论文4篇，申请国家发明专利2项，培养硕士研究生1名（与成都中医药大学联合培养）。