幽门螺杆菌免疫应答对胃癌预后的影响：新假说验证与作用机制研究

幽门螺杆菌（Hp）与胃癌发生密切相关。最新报道，Hp相关胃癌（Hp-GC）的总生存和无进展生存均长于非Hp 相关胃癌（nHp-GC），这对胃癌防治将有重要影响，但其原因尚不清楚。我们认为，Hp有高感染率及持续带菌免疫特质，在导致癌变发生后，其感染状态及免疫应答水平对胃癌进展和预后可能还有后续作用。就此我们已发表新假说：Hp-GC在癌变发生后，Hp诱发的体液及细胞免疫应答可能有助于延缓肿瘤进展、改善预后。本项目拟构建、筛选分别靶向Hp VacA、CagA、BabA的高效DNA疫苗，免疫小鼠，制备多抗，并分选脾脏CD4+T/CD8+T细胞；建立MFC胃癌细胞的同源小鼠腹腔荷瘤模型，体内实验以高效DNA疫苗分组免疫，检测体液/细胞免疫应答，评估肿瘤改变及生存变化；体外用多抗及分选的T细胞与胃癌细胞共培养，检测增殖/凋亡、侵袭力等改变。本项目有望验证新假说、提出作用机制，对胃癌防治有潜在应用价值。

幽门螺杆菌（Hp）与胃癌发生密切相关。最新报道，Hp相关胃癌（Hp-GC）的总生存和无进展生存均长于非Hp 相关胃癌（nHp-GC），这对胃癌防治将有重要影响，但其原因尚不清楚。我们认为，Hp有高感染率及持续带菌免疫特质，在导致癌变发生后，其感染状态及免疫应答水平对胃癌进展和预后可能还有后续作用。就此我们已发表新假说：Hp-GC在癌变发生后，Hp诱发的体液及细胞免疫应答可能有助于延缓肿瘤进展、改善预后。在本项目实施中：（1）首先，我们通过生物信息学软件，分析了Hp VacA、CagA和BabA等主要抗原的免疫学表位，成功获得了免疫表位的序列及分布情况。（2）构建、筛选分别靶向VacA、CagA、BabA不同区段的多个DNA疫苗，检测发现疫苗免疫后体液/细胞免疫应答均明显增强，成功筛选获得了较高免疫原性的DNA 疫苗；此外，免疫小鼠后成功制备多抗，并分选获得高纯度的脾脏活化T细胞。（3）成功建立了MFC胃癌细胞的荷瘤裸鼠模型，将分选的Hp特异性抗原活化的脾T细胞过继免疫输注后，可有效抑制胃癌生长，尤其Hp VacA+CagA联合有高效抑制作用。（4）进一步检测发现，上述作用的机制主要涉及：局部CD4+Foxp3+调节性T细胞数量的减少；CD8+细胞毒性T细胞（cytotoxic T-cell, CTL）比例的增高；影响肿瘤血管生成和细胞增殖、凋亡的多条TCR信号转导通路的活化（Ras-Raf-Erk/1/2-Fos，Rac/cdc42-JNK-Jun，以及PI3K-Akt-mTORC-HIF1等）。本项目提示：Hp相关细胞免疫应答可能对改善胃癌预后有积极的促进作用，从而验证了上述新假说,提出了作用机制。本项目的完成，对胃癌防治有潜在应用价值。