柞蚕雄蛾液靶向BAMBI基因转录调控在逆转酒精性肝纤维化中的作用及关键机制的研究

To reverse the liver fibrosis induced by alcohol is one of the hot points in ALD and this is the key to terminate the process of liver cirrhosis forming, so the central problem is to know the mechanism and find the effective drugs. The early research proved that Bambi which is the TGF-β false receptor regularly changes after alcohol intragastric administration and Antheraea Male math fluid can upregulate Bambi. Part of the mechanism of Bambi transcription is clear in tumor, but up to now that is still unknown in alcohol liver fibrosis. This study is to investigate the Antheraea Male math fluid's regulation to transcription of Bambi in hepatic stellate cells after alcohol intragastric administration through sieving the promoter of Bambi through Data base and using local preferred mutation to make sure the mechanism. This work make up a deficiency of the mechanism of Bambi gene in liver fibrosis induced by alcohol and can provide a new path to study the ALD pathogenesis . The outcome of this study will supply the new treating target and the theory basis of reversing the alcohol liver fibrosis and how could Antheraea Male math fluid regulate Bambi transcription and inhibit liver fibrosis too.

逆转酒精性肝纤维化是酒精性肝病(ALD)研究领域中的热点课题之一，是终止ALD 进展为肝硬化的关键，探讨其机制并寻找有效治疗药物是亟待解决的核心问题。本实验室前期研究发现肝星形细胞跨膜抑制剂（Bambi）在酒精灌胃小鼠肝组织中的含量呈规律性变化，柞蚕雄蛾液可使肝Bambi升高。Bambi转录调控多见于肿瘤研究，在酒精性肝纤维化研究中国内外尚为空白。另外柞蚕雄蛾液还有保肝降酶、抗氧化、下调TGF-β，免疫增强等功能。本课题拟通过体内外实验采用已有数据库筛选Bambi启动子区转录调控位点，应用定点突变、EMSA等技术，研究柞蚕雄蛾液调控Bambi基因转录的作用及逆转酒精性肝纤维化机制。该研究结果填补Bambi基因在酒精性肝纤维化发病机制中的空白，为ALD的发病机制提供新的研究途径，不但为逆转酒精性肝纤维化提供新的治疗靶点，且为柞蚕雄蛾液靶向Bambi基因转录调控治疗ALD提供坚实的理论基础。

逆转酒精性肝纤维化是酒精性肝病(ALD)研究领域中的热点课题之一，是终止ALD 进展为肝硬化的关键，探讨其机制并寻找有效治疗药物是亟待解决的核心问题。前期研究发现，柞蚕雄蛾液可使肝BAMBI升高，还有保肝降酶、抗氧化、下调TGF-β ，免疫增强等功能。BAMBI 转录调控多见于肿瘤研究，在酒精性肝纤维化研究中国内外尚为空白。本实验通过观察柞蚕雄蛾液对酒精性肝纤维化动物模型的作用及转化生长因子β1/Smads、结缔组织生长因子、金属蛋白酶组织抑制因子-1、BAMBI、Toll样受体与细胞间隙连接蛋白43在肝脏中表达变化的情况，探讨柞蚕雄蛾液保护肝脏的作用机制；并且通过对EMT相关指标Twist蛋白、E-钙黏蛋白与波形蛋白表达情况进行分析，探讨酒精性肝纤维化过程中 EMT的发生及柞蚕雄蛾液对EMT的影响，可为临床逆转肝纤维化提供理论依据。结果发现柞蚕雄蛾液对酒精诱导的小鼠肝纤维化具有显著的预防作用，其机制可能与调控TGF-β1/Smad2/3信号转导通路，下调TIMP、CTGF、BAMBI及TLR4抑制HSC的活化与增殖有关。柞蚕雄蛾液对上皮-间质转化的现象具有明显的抑制作用，可能与下调Twist与Vimentin表达，上调Connexin 43与E-cadherin表达有关。另外发现在酒精性肝纤维化过程中有肝细胞上皮-间质转化的发生，上皮-间质转化可能在酒精诱导的肝纤维化过程中发挥重要作用。该研究结果填补BAMBI基因在酒精性肝纤维化发病机制中的空白，为ALD 的发病机制提供新的研究途径，不但为逆转酒精性肝纤维化提供新的治疗靶点，且为柞蚕雄蛾液靶向BAMBI基因转录调控治疗ALD 提供坚实的理论基础。