雄黄不同形态砷在主要毒性靶器官的选择性蓄积及与毒性相关性研究

砷在生物体内以无机砷和有机砷的不同形态存在，依形态不同毒性有较大差异。国内外学者针对雄黄中总砷对脏器组织的毒性或砷在体内的吸收和分布进行了相关的研究，但对雄黄中砷的不同形态与毒性的相关性研究较少。很多关键问题有待阐明，如：雄黄中的不同形态砷在主要毒性靶器官中的蓄积性、不同形态砷在体内的代谢规律、以及不同形态砷与毒性的相关性等。本项目拟使用大鼠单次和反复灌胃给予雄黄，通过检测不同时间点血液、主要毒性靶器官、尿液、粪便中总砷和不同形态砷（包括主要的无机砷和有机砷）的含量，探讨雄黄不同形态砷的代谢和蓄积规律；并结合全面的血液、尿液、脏器病理学等毒性研究，以探讨不同形态砷在主要毒性靶器官中的选择性蓄积及其与毒性的相关性，为科学制定雄黄的质量标准、安全剂量以及为雄黄的炮制、制剂工艺等提供科学依据。

砷在生物体内以无机砷和有机砷的不同形态存在，依形态不同毒性有较大差异，国内外学者针对雄黄中总砷对脏器组织的毒性或砷在体内的吸收和分布进行了相关的研究，但对雄黄中砷的不同形态与毒性的相关性研究较少。本研究通过对大鼠单次和多次灌胃给予雄黄后主要毒性靶器官、血液、尿液、粪便中总砷和不同形态砷（包括主要的无机砷和有机砷）的含量分析，探讨雄黄不同形态砷的代谢和蓄积性规律。结合全面的血液、尿液、脏器病理学等毒性研究，以探讨不同形态砷在主要毒性靶器官中的选择性蓄积及其与毒性相关性。大鼠单次灌胃给予雄黄0.17g·kg-1后，雄性大鼠肝、肾、脑及血中总砷峰值由高到低的顺序为：血＞肾＞肝＞脑，雌性大鼠总砷峰值由高到低的顺序为：血＞肝＞肾＞脑；大鼠总砷的浓度-时间曲线下面积(AUC)由大到小的顺序为：血＞肝＞肾＞脑；雄性大鼠0-12h尿液DMA＞MMA＞As(3)＞As(5)，12-24h尿液DMA＞MMA＞As(5)＞As(3)。大鼠0-12h和12-24尿中DMA最高，由高到低依次为DMA＞MMA＞As(5)＞As(3)，0-12h尿总砷和不同形态砷均明显高于12-24h。大鼠连续灌服雄黄0.01g·kg-1·d-1超过60天，可影响大鼠凝血系统，使血液高凝，连续灌胃雄黄0.04g·kg-1·d-160天，APTT缩短、肾指数增高、尿蛋白增高、少数肾出现轻微病变；服用90天后，PT时间也缩短，BUN明显增高，并引起大鼠肝、肾形态学改变，雌性大鼠可引起体重减轻。0.17g·kg-1·d-1服用60天后，还可引起肝、肾的形态学改变；服用90天后，不但会使大鼠的PT和APTT时间缩短、毛发稀疏、无光泽、体重下降，BUN增高，还造成肝脏和肾脏病理形态学的改变，肾组织出现不同程度的细胞肿胀，胞浆空泡变性，核固缩、溶解及血管扩张、充血等病变；超过40%的肝细胞轻度浊肿、变性，炎细胞浸润，10-20%肝细胞出现片状浊肿、嗜酸性变及灶状坏死等。肝、肾病变呈明显的量-时-毒关系。因此，长期服用雄黄可引起大鼠肝、肾毒性损伤，并具有明显的量-时-毒关系，肾近曲小管可能是砷肾毒性作用的主要靶部位。以上研究结果将为科学制定雄黄的质量标准、安全剂量以及为雄黄的炮制、制剂工艺等提供了科学依据。