SMARCAL1 作为抗肿瘤新靶点的确证与机制

放疗和化疗药可激活肿瘤细胞的DNA修复反应而形成耐药性，因此以DNA修复为靶点成为了一种抗肿瘤药研发新策略。SMARCAL1为新发现的DNA修复相关分子，研究发现SMARCAL1聚集在DNA损伤部位，参与DNA修复和复制，其缺失则引起细胞DNA损伤增加。我们的工作证明，SMARCAL1缺失导致细胞周期停滞，凋亡增加，表明其可能通过调控细胞周期而参与DNA修复。SMARCAL1的ATP酶活性使其成为一个理想的药物靶点。本研究将使用shRNA等技术建立SMARCAL1缺失的人淋巴细胞瘤细胞株，分析基因缺失对肿瘤细胞生存，细胞周期，细胞凋亡的影响及这些肿瘤在裸鼠中的生长情况，并应用DNA修复缺陷模型研究其参与何种DNA修复形式，以揭示该基因作为抗肿瘤新靶点的分子机制。同时建立SMARCAL1抑制剂筛选模型，进行大规模筛选以获得先导化合物，为开发具有自主知识产权的新型抗肿瘤药物建立理论和实验基础。

SMARCAL1为DNA修复相关分子，研究发现SMARCAL1聚集在DNA损伤部位，参与DNA修复和复制，其缺失则引起细胞DNA损伤增加。本研究发现SMARCAL1缺失导致细胞周期停滞，凋亡增加，表明其可能通过调控细胞周期而参与DNA修复。使用shRNA等技术建立了SMARCAL1缺失的人淋巴细胞瘤细胞株，发现基因缺失显著降低了肿瘤细胞生存，改变细胞周期，增加细胞凋亡，并抑制肿瘤在裸鼠中的生长，从而揭示了SMARCAL1作为抗肿瘤新靶点的分子机制，为开发具有自主知识产权的新型抗肿瘤药物建立理论和实验基础。.建立SMARCAL1的ATP酶活性抑制剂筛选模型，进行筛选，获得ATP酶活性抑制剂。通过筛选，我们发现了数个SMARCAL1抑制剂。在本课题中，我们发现了莲心碱可以诱导乳腺癌细胞自噬性死亡，抑制肿瘤细胞自噬降解。莲子心通过抑制自噬小体与溶酶体的融合，从而抑制自噬降解过程，其分子机制可能是抑制溶酶体招募RAB7A蛋白过程。莲心碱与自噬诱导剂雷帕霉素在多种指标上具有相反的作用，而与自噬抑制药物BafilomycinA1相似。证明莲心碱是一种新型的抑制自噬降解，具有开发前景的自噬抑制药物。.通过考察土木香内酯对A375肿瘤细胞生长、细胞凋亡和细胞周期的影响，并探讨土木香内酯促凋亡和阻滞细胞周期的作用机制。我们的研究表明，土木香内酯在体内外均具有显著的抑制A375肿瘤细胞生长的作用。这可能与土木香内酯激活caspase家族蛋白活性，促进肿瘤细胞的凋亡，阻滞细胞周期在G2/M期有关。机制研究表明，土木香内酯显著降低TUBA1C和TUBA3C的mRNA，抑制α-tubulin的表达和纺锤体的形成。土木香内酯小鼠移植瘤也具有显著的抑制作用，因此其具有一定的临床开发价值。.通过筛选发现麦冬皂苷D具有显著的抑制肿瘤细胞生长的作用。本研究发现麦冬皂苷D能显著抑制MCF-7乳腺癌细胞的增殖活性，将细胞周期阻滞在G2/M分裂时期，使细胞分裂时间延长，并诱导MCF-7乳腺癌细胞凋亡。机制研究表明，麦冬皂苷D诱导MCF-7乳腺癌细胞凋亡与细胞周期相关蛋白 CyclinB1及Caspase家族蛋白的表达紧密相关。我们的实验结果表明，麦冬皂苷D抑制MCF-7乳腺癌可能与下调细胞周期相关蛋白CyclinB1的表达有关。本研究为麦冬皂苷D的进一步临床研究提供理论依据。