独创MyD88抑制剂在乳腺癌侵袭转移中作用及机制研究

Breast cancer is the most common malignancy in women. Invasion and metastasis account for the vast majority of breast cancer deaths. It is generally accepted that epithelial-mesenchymal transition (EMT) is an important mechanism of invasion and metastasis. Research indicated that high expression of MyD88 promoted the EMT properties. In addition, the activation of MyD88/NF-κB signaling pathway produced IL-6 and TNF-α, which played an important role in the tumor microenvironment. Our previous results confirmed that MyD88 inhibitor could inhibit the inflammation caused by AOM / DSS and reverse TGF-β1-induced EMT in HK-2 cells. And our preliminary experiment indicated that MyD88 expression increased in MDA-MB-231 cells; MyD88 inhibitor (TJ-M2010-2) attenuated the invasion ability of MDA-MB-231 cells induced by LPS. Therefore, we hypothesize that TJ-M2010-2 can suppress the activation of MyD88/NF-κB signaling pathway by LPS, hinder EMT in breast cancer cells, reduce the secretion of inflammatory factors, and change the microenvironment of tumor, thereby reduce invasion and metastasis. In this study, we explore the role of MyD88 inhibitors on invasion and metastasis of breast cancer cells in vitro and in vivo by using breast cancer cell line, reveal its molecular immunological mechanism, and provide a new strategy for early treatment of breast cancer.

乳腺癌是女性最常见的恶性肿瘤，侵袭和转移为乳腺癌患者死亡的主要原因。上皮间质转化（EMT）是肿瘤细胞侵袭与转移的重要机制。研究表明，MyD88高表达促进EMT；MyD88/NF-κb信号通路激活后产生IL-6、TNF-α等在肿瘤微环境中发挥重要作用。我们前期成果证实MyD88抑制剂减轻AOM/DSS引起的炎症；并且逆转TGF-β1诱导HK-2细胞EMT。我们预实验中证明MDA-MB-231细胞MyD88表达增加；MyD88抑制剂（TJ-M2010-2）减弱LPS所诱导MDA-MB-231细胞侵袭能力。因此我们提出假说：通过TJ-M2010-2抑制LPS对MyD88/NF-κB信号通路激活，阻碍乳腺癌细胞EMT发生，减少炎性因子分泌，改变肿瘤微环境。本研究利用人乳腺癌细胞系，在离体和在体水平，探索MyD88抑制剂对乳腺癌细胞侵袭和转移的作用，揭示其分子机制，为乳腺癌早期治疗提供新策略。

乳腺癌是女性最常见的恶性肿瘤，严重威胁女性生命健康。复发及转移，是乳腺癌患者死亡的主要原因。这与原位肿瘤细胞发生上皮间质转化（epithelial-mesenchymal transition， EMT）密切相关。.上皮间质转化（EMT）是指具有极性的上皮细胞转化成为具有移行能力的间质细胞，目前普遍认为 EMT 是肿瘤细胞发生侵袭与转移、 化疗耐药以及可塑性的重要机制。高表达的MyD88通过激活 PI3-K/Akt 信号通路，促进EMT进程。此外， MyD88/NF-κb信号通路激活后产生一系列细胞因子，如 IL-1、IL-6、IL-8、TNF-α、TGF-β1 等在肿瘤微环境中发挥重要作用。.以上表明 MyD88 分子在乳腺癌侵袭转移治疗当中是一个非常有潜力的靶点分子。我们使用独创小分子氨基噻唑类衍生物 MyD88 抑制剂（TJ-M2010-2）。TJ-M2010-2对MCF-7和MDA-MB-231细胞的作用是通过抑制增殖而非促进凋亡。LPS + siMyD88组和LPS + TJ-M2010-2组迁移和侵袭细胞数量显著减少。TJ-M2010-2或siMyD88逆转LPS诱导的EMT。TJ-M2010-2降低LPS诱导的BC细胞分泌MMP-2、MMP-9、IL-6、IL-8、TGF-β1和TNF-α。TJ-M2010-2下调LPS诱导的BC细胞MyD88/NF-κB/Snail和MyD88/GSK-3β/Snail信号通路。在体内，与对照组相比，LPS组ki67和CD31表达显著增加。而在LPS联合TJ-M2010-2组，其表达下降。与对照组相比，TJ-M2010-2组显著抑制了α-SMA的表达，同时恢复了E-cadherin的表达。LPS显著促进IL-6、IL-8、TGF-β1和TNF-α的产生，增加肿瘤M2比例，而TJ-M2010-2抑制LPS的作用，其机制为降低MyD88、TRAF6、NF-κB p65、Snail、MMP-2、MMP-9、pGSK-3β、p-Akt表达。.慢性炎症相关的癌症风险增加说明了异常的组织组织和稳态会增加肿瘤发生的机会。这种联系在结肠癌、胃癌和肝细胞癌中最为明显，其机制可能是导致肿瘤发生的一种可能机制是上皮干细胞生态位的改变以及由于炎症细胞分泌的因子而导致的干细胞库的扩张。我们最新研究表明，通过乳头导管内注射LPS，随后能够引起乳