miR-199靶向调控Jagged1/Notch信号通路促进胰腺癌EMT和新生血管形成的作用与机制

Invasion and metastasis is the main reason for the high mortality of malignant pancreatic cancer, but the mechanisms are unknown. Our previous study have found that miR-199 was epigentically silenced in pancreatic cancer.Tumor cell line transfection miR-199 can inhibit cancer cell proliferation, migration and TGF - beta induced EMT transformation, inhibit angiogenesis, suggests that miR-199 is a new tumor suppressor gene. Our preliminary work also found that Jagged 1 is one of the main target genes of miR-199.In the present study, we will explore the mechanisms of down-regulation of miR-199 in pacreatic cancer, the role of miR-199 in the regualtion of Jagged 1 / Notch signaling pathway and EMT transformation, angiogenesis, by using the new techology such as gene and the miRNA transfection, RNA interference, luciferase report system , chromatin immune coprecipitation etc.Our aims are to identify that Jagged 1 is the target gene of miR-199 and to reveal the role of a new miRs played in EMT and angiogenesis in pancreatic cancer; Our study provides new clues for proventing invasison and metastasis of pancreatic cancer by target miR-199.

高侵袭转移率是胰腺癌恶性程度高的主要原因，但机制不明。我们前期研究发现miR-199在胰腺癌表达沉默。肿瘤细胞株中转染miR-199能抑制癌细胞的增殖、迁移和TGF-β所诱导的EMT转化，抑制血管生成，提示其是一个新的具有抑癌作用的miRs，初步确认Jagged 1是其主要靶基因之一。本课题拟利用基因和miRNA转染、干扰、荧光素酶报告系统、染色质免疫共沉淀等技术手段，从临床样本、细胞和动物模型三个层次，深入研究miR-199下调表达的表观遗传调控机制，验证Jagged 1是miR-199的靶基因及Jagged 1/Notch信号通路在胰腺癌EMT转化及新生血管中的作用。本课题旨在揭示一个新的miR在胰腺癌EMT转化和肿瘤新生血管之间的作用，鉴定miR-199及Jagged 1作为胰腺癌侵袭和转移潜在治疗靶点的可能性，为胰腺癌侵袭、转移的分子机制提供新的理论基础。

高侵袭转移率是胰腺癌恶性程度高的主要原因，但机制不明。我们前期研究发现在肿瘤细胞株中过表达miR-199能抑制癌细胞的增殖、迁移和TGF-β所诱导的EMT转化，抑制血管生成，提示其是一个新的具有抑癌作用的microRNA，初步确认Jagged 1是其主要靶基因之一。.本课题从临床样本、细胞水平和动物模型三个层次，利用基因高通量筛选、miRNA转染、干扰、荧光素酶报告系统、Western blot等技术手段，在116例临床胰腺癌和癌旁组织中证实miR-199在肿瘤中的表达显著低于癌旁组织；通过构建过表达和和敲减miR-199的胰腺癌细胞系，发现miR-199对细胞周期相关蛋白的表达无明显抑制作用，但miR-199过表达能明显抑制细胞的凋亡，促进细胞的迁移能力，下调miR-199却显著抑制了细胞的血管形成能力，并且促进胰腺癌细胞的EMT 转化，提示miR-199具有潜在的抑制肿瘤的作用；深入研究了胰腺癌中miR-199下调表达的DNA甲基化调控机制，验证Jagged 1是miR-199的靶基因及Jagged 1/Notch信号通路在胰腺癌EMT转化及新生血管中的作用。同时，本课题还揭示了一个与胰腺癌关系更密切的新的microRNA分子：Hsa-miR-30c, 其在胰腺癌中的表达亦降低，但是miR-30c在肿瘤中的甲基化水平比miR-199更高；我们同样研究了导致Hsa-miR-30c表达降低的甲基化调控机制，发现Hsa-miR-30c能够靶向K-ras调控EGFR信号通路的表达。.本课题揭示了一个新的miR在胰腺癌EMT转化和肿瘤新生血管之间的作用，证实miR-199和miR-30c可作为胰腺癌诊断、治疗和预后的潜在靶点，为胰腺癌侵袭、转移的分子机制研究提供了新的理论基础。