木薯体细胞杂交创新种质及其分子鉴定

Somatic hybridization is an effective complementary method to overcome sexual barriers and break the limitations of conventional breeding. In this study, calli protoplasts will be isolated from suspensions derived from friable embryogenic callus (FEC) of cassava genotype TMS60444 and mesophyll protoplasts will be isolated from leaves of cassava genotype SC8. Electrofusion will be carried out between calli protoplasts and mesophyll protoplasts, and then fusion products are to be cultured and developed into plants. Hybrids are to be identified from regenerated plants by morphology, cytology and molecular markers methods. In the research, interspecific hybridization of cassava is expected tobe implemented by somatic hybridization technology. And a set of somatic hybridization technology suited for cassava is to be built to enhance germpalsm and overcome the limitations of cassava breeding of in Guangxi. The results of the study will provide a new way for cassava breeding.

体细胞杂交是克服有性生殖障碍和传统育种方法局限的一种有效补充手段。本研究分离木薯品种TMS60444 脆性胚性愈伤组织（FEC）悬浮系原生质体和木薯品种华南 8 号（SC8）叶肉原生质体，将愈伤原生质体和叶肉原生质体在电场作用下进行融合并培养、再生，对再生植株通过形态学、细胞学、分子标记等手段筛选鉴定杂种。本研究拟运用体细胞杂交技术实现木薯种内杂交，期望建立一套适合木薯的体细胞杂交技术，创制木薯新种质，克服广西木薯育种难的限制，为木薯育种提供一条新途径。

木薯是一种重要的粮食和工业原料作物。为了创新木薯种质，木薯品种TMS60444脆性胚性愈伤组织（FEC）悬浮系原生质体和木薯品种华南8号（SC8）叶肉原生质体在电场作用下进行融合，融合产物在TM2G培养基中培养，此后不断降低培养基渗透压促进细胞团的分裂。培养将近1-2个月，原生质体起源的致密愈伤转移到SH液体培养基悬浮培养。然后致密愈伤分别转移到MSN培养基上分化胚胎，CMM培养基上分化成熟子叶胚胎，CEM培养基上生芽生长，然后在MS培养基中生根。得到了66个胚性愈伤组织（细胞系），其中13个细胞系再生成了完整植株。经流式细胞仪分析，得到了9个四倍体细胞系。经流式细胞仪分析和染色体压片确认，得到了4个四倍体植株系。经SSR分析，得到了1个二倍体变异植株系和9个二倍体变异愈伤细胞系，它们的变异均是表现在愈伤亲本TMS60444的基因组成上的部分基因丢失。.木薯原生质体在电场作用下融合了，并且再生了完整四倍体植株，创制了木薯新种质，初步建立了一套木薯细胞融合技术，也再次证明了我们建立的木薯原生质体再生体系的可操作性，为木薯组织培养提供了一些技术指导，也为木薯细胞工程和基因工程提供了一些有益的启发和参考。