NLRP7基因突变导致中国人种葡萄胎发生的分子机制研究

Hydatidiform mole is an aberrant human pregnancy with no embryo. This incidence is higher in some geographicalregions mainly in South Eastern Asia. By studying a rare familial form of this condition, the group of Dr Slim identified the first and major gene, NLRP7, for recurrent moles that is mutated in patients from several population.However, little is known about the functional role of NLRP7.mutations in this gene are associated with reduced cytokine secretion by peripheral blood mononuclear cells from patients with mutations after stimulation with lipopolysaccharides during in vitro culture.However,this analysis was performed on a small number of patients,only five,.with NLRP7 mutations from which fresh blood samples were available. Here, we want to demonstrate how peripheral blood mononuclear cells from Chinese patients with NLRP7 mutations response to inflammation. We will also confirm the role of NLRP7 mutations in the expression of downstream proteins by in vitro cell study. This will uncover the mechanism by which NLRP7 mutations cause increased risk of hydatidiform mole, and will be used as experimental evidence for clinical treatment and prevention.

葡萄胎(Hydatidiform Mole,HM)是一种异常的人类妊娠。葡萄胎发病具有种族与地域的差异。通过对家族性复发性葡萄胎的研究，SLIM 团队在不同人种中发现了第一个与复发性葡萄胎相关的致病基因NLRP7基因。有关NLRP7基因功能研究的数据极其馈乏。唯一的一个体外研究提示NLRP7基因突变者外周血淋巴细胞对各种炎症刺激反应受损， 由于数据仅来源于5 例NLRP7基因突变患者的外周血淋巴细胞，其结论可信性度受限。本研究评估NLRP7基因突变的中国人种葡萄胎患者的外周血淋巴细胞对炎症刺激的反应；并建立体外细胞研究模型评估NLRP7基因突变后对其下游蛋白表达的影响，探讨NLRP7基因突变导致中国人种葡萄胎发生的分子机制。为后续的相关防治提供实验依据。

葡萄胎(Hydatidiform Mole, HM)是常见的异常妊娠结局。具有种族与地域的差异，亚洲地区为葡萄胎高发地区。目前已有的报道显示，NLRP7为主要的致病基因，约占48-80%。通过对中国复发葡萄胎病人的近十年的筛查，我们认为中国人NLRP7突变率为27.5%。.我们依据筛查得到的中国人NLRP7突变位点建立体外细胞研究模型，结合葡萄胎患者的外周血淋巴细胞对炎症刺激的反应，综合评估NLRP7基因突变后可能参与的分子机制。.结果表明葡萄胎患者外周血淋巴细胞对于炎症刺激的反应因其突变形式和位点的不同而不同。单点突变的病人，体外培养外周血淋巴细胞上清中，IL-1β的分泌未发现下降。纯合子突变和杂合子多点突变的双亲来源葡萄胎病人，其IL-1β和TNF-α明显降低。而非NLRP7突变的双亲来源复发葡萄胎病人没有IL-1β的降低。进一步研究表明，上清中低分泌的IL-1β因突变位置和形式不同而来源不同。在纯合子突变病人中，发生在NACHT区域的蛋白截断突变导致合成的pro-IL-1β显著降低，而发生在LRR区域的点突变则高表达pro-IL-1β同时低表达mature-IL-1β。多点杂合子突变的病人，其pro-IL-1β表达显著降低。体外细胞模型表明有义突变的NLRP7质粒参与加工更多的pro-IL-1β，而同时存在于普通人群中的变异型突变，则未减弱NLRP7抑制pro-IL-1β加工的作用。.通过对病人外周血淋巴细胞和体外点突变细胞模型的研究，我们认为IL-1β可能是一个区别双亲来源复发葡萄胎病人是否有NLRP7突变的指标。同时，不同区域的纯合和杂合突变可能作用于IL-1β合成、加工和分泌的不同过程，并最终导致上清IL-1β降低，这一过程可能导致是纯合和杂合突变的生育结局更不理想的致病机制。尽管含有两个低评分突变的杂合基因不影响IL-1β合成、加工和分泌，但是细胞模型研究显示，其联合作用可能参与加工更多的pro-IL-1β，因此该杂合突变可能在早期胚胎发育中发挥母源效应基因的作用而导致葡萄胎的发生。..本课题提供了中国人NLRP7基因突变在母体免疫层面可能参与的相关机制，为临床治疗方案的选择提供更完善参考证据。