补体调节蛋白CD46在大疱性类天疱疮发病中的作用及机制研究

Bullous pemphigoid (BP) is an autoimmune bullous disease caused by autoantibodies against BP180 in the epidermal basement membrane. Autoantibody-mediated complement activation is an important process in BP pathogenesis. CD46, a crucial complement regulatory protein in the complement activation, has been reported to be involved in several autoimmune diseases. In the present study, we investigated whether CD46 plays a role in BP development. We found that sCD46 expression was significantly increased in the serum and blister fluids of BP patients and correlated with the levels of anti-BP180 NC16A antibody and C3a. Otherwise, the level of mCD46 was decreased in lesions of BP patients, whereas the complement activation was enhanced. We also found that mCD46 knockdown in HaCaT human keratinocytes enhanced autoantibody-mediated complement activation. These data suggest that mCD46 deficiency is an important factor in BP pathogenesis and the dysregulation of mCD46 and sCD46 is closely related to the pathogenesis of BP. Based on this, we are aimed to deepen our understanding on the pathogenesis of BP and to explore new specific therapeutic strategies by preventing complement activation via increasing CD46 levels.

大疱性类天疱疮（BP）是一种常见的自身免疫性水疱病，致病性自身抗体与表皮基底膜带BP180等抗原结合并导致补体系统的激活是BP发病的关键环节。补体调节蛋白是一类具有调节补体活化作用的分子，其表达水平和功能异常与多种自身免疫性疾病密切相关。CD46是重要的补体调节蛋白之一，我们的研究发现，BP患者血清及疱液中sCD46明显高表达，并与补体C3a和BP180-NC16A致病性抗体滴度呈正相关，而皮损处mCD46表达水平明显低于正常人。在体外构建的BP病理模型中，降低mCD46的表达可使BP自身抗体介导的补体活化反应明显增强，提示mCD46和sCD46的表达失衡与BP发病密切相关。本课题拟在组织和细胞水平以及BP动物模型中验证CD46表达异常参与BP发病的具体环节和分子机制，从而阐明补体调控紊乱在BP发病中的地位和作用，为深入了解BP发病机制及治疗新策略提供新思路。

大疱性类天疱疮（BP）是一种由表皮基底膜中针对BP180的自身抗体引起的自身免疫性大疱性疾病，自身抗体介导的补体激活是BP发病中的关键环节。CD46是补体系统活化过程中重要的调节蛋白，与多种自身免疫性疾病相关。本研究主要关注CD46是否参与BP发病。我们发现，sCD46在BP患者的血清和疱液中显著高增加，并且与抗BP180 NC16A自身抗体和补体C3a的表达成正相关，同时，BP患者的皮损中mCD46的表达水平显著降低，而补体活化程度增强。体外模拟BP病理模型，发现降低人角质形成细胞HaCaT细胞系中CD46表达后可增强自身抗体介导的补体激活。其次，外源性加入CD46重组蛋白可阻断健康皮肤组织和角质形成细胞中补体的激活。我们利用流式细胞术检测还发现，CD46可促进BP患者及正常人PBMC细胞向TH2型细胞分化，BP患者CD4+T细胞和CD8+T细胞表达的CD46较健康人无差异，说明BP患者血清中高表达的CD46可通过促进T细胞向TH2细胞分化，加重BP免疫反应。此外，我们还利用基因工程手段构建了CD46-CD55融合蛋白，期望对BP补体激活具有更强的抑制作用。我们在体外模拟了BP病理过程，免疫荧光结果发现，在加入融合蛋白后，细胞膜处的C3b沉积被明显抑制，抑制作用大于单独加入CD46和CD55，细胞水平及组织水平均证明融合蛋白CD46-CD55具有更强的补体抑制作用，有望为BP治疗提供新的策略。以上数据表明，CD46是BP发病过程中的重要因素，为治疗BP提供了新的思路。