盐藻钠/磷共转运体基因DvSPT1和DvSPT2启动子盐诱导元件的鉴定及相关转录因子的分离与功能分析

通过抑制差减杂交技术，我们从盐藻中分离了两个受盐高度诱导表达的钠/磷共转运体cDNA，DvSPT1和DvSPT2。为了研究这两个基因的表达调控机理及盐藻耐盐信号传导通路，我们从盐藻基因组BAC文库中分离并测定了DvSPT1和DvSPT2的启动子序列。生物信息学分析发现这两个基因的启动子中含有多个胁迫应答元件。本申请就是在以上研究的基础上，通过DNA足迹分析、凝胶阻滞实验鉴定DvSPT1和DvSPT2基因启动子中的盐诱导元件。在此基础上，应用酵母单杂交技术分离与盐诱导元件相互作用的转录因子。然后，对所分离的转录因子与盐诱导元件的结合特性、转录因子的转录激活活性及其在盐藻体内的表达特性进行分析，确认所分离的转录因子在盐藻耐盐信号传导中的作用。最后，在以上理论研究的基础上，将所分离的转录因子基因转化衣藻及拟南芥，研究其在提高藻类及高等植物的抗逆性中的作用。